分光光度计测定蛋白质含量的依据是？ 求 怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量
有机化合物在紫外区具有特征的吸收光谱，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判断化合物在不
同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂
蛋白质中有氢键根据
紫外光谱就能测定蛋白质了
根据蛋白质的紫外吸收，或是考马斯亮蓝染色法或者LOWRY法显色
你说的哪种，不过不管哪种都要用分光光度测定
紫外分光光度法测量蛋白质的含量的原理？~
1紫外吸收光谱是基于物质的生色团和助色团的特性对紫外光谱的吸收，可用于物质的鉴定和结构分析.
2参与蛋白质组成的20种氨基酸中色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基团中含有苯环共轭双键系统，在紫外光区（220-300nm）显示特征的吸收谱带，最大光吸收（max）分别为279、278、和259nm。由于大多数蛋白质都含有这些氨基酸残基，因此用紫外分光光度法可测定蛋白质含量。
因此可以用标准曲线法在280nm测样品吸光度，求得蛋白含量。
1、280nm的光吸收法
用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。
2、280 nm和260 nm的吸收差法
核酸对紫外光有很强的吸收，在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克)，但核酸在260 nm处的吸收更强，其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm处的消光系数是280 nm处的2倍；而蛋白质则相反，其280 nm的紫外吸收值大于260 nm的吸收值。
3、215 nm与225 nm的吸收差法
蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280 nm的光吸收测定时，可用215nm与225 nm吸收值之差，通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度。
4、肽键测定法
蛋白质溶液在238 nm处的光吸收的强弱，与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50～500 mg/mL已知浓度的5.0 mL蛋白质溶液，测定238 nm的光吸收值A238，以A238为纵坐标，蛋白质含量为横坐标，绘制出标准曲线。未知样品的浓度即可由标准曲线求得。
扩展资料：
紫外分光光度法原理
光谱法（spectrometry）是基于物质与电磁辐射作用时，测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法；或分为原子光谱法和分子光谱法；或分为能级谱，电子、振动、转动光谱，电子自旋及核自旋谱等。
分光光度法是光谱法的重要组成部分，是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。常用的技术包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法等。
紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。
参考资料来源：百度百科-紫外分光光度法
分光光度计测定蛋白质含量的依据是?
答：以OD280为例，那是因为，组成蛋白质的氨基酸中有两种氨基酸苯丙氨酸和色氨酸带有苯环结构，在280nm有吸收峰；因此280nm的吸收值代表了这两种氨基酸的含量，再以此推断整个蛋白的含量（就像氨基酸的评价分子量是110一样。）
bradford法测定蛋白质含量的原理是什么?应如何克服不利因素对测定的影响...
答：bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色，用分光光度计在吸光度595nm处读数，通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线，再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构，缓冲液组分中有干扰试剂等。双缩脲法和Folin—酚试剂法...
光度计比色法蛋白质定量
答：由于蛋白质浓度与形成有色物质的量成比例，吸光度或反射光的改变就可以反映蛋白质的浓度。通过校准曲线，可以将测量值转化为具体的蛋白质含量。这种方法因其准确性、灵敏度和成本效益而被广泛应用于医学、生物技术、食品工业等领域。然而，值得注意的是，光度计比色法的准确性依赖于显色反应的特异性、实验...
测定蛋白质含量的方法有哪些,其原理各是什么
答：凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右，因此，通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量(假设测定物质中的氮全来自蛋白质)，即: 蛋白质含量=含氮量/16%。2、紫外吸收光谱法 紫外吸收光谱法又称紫外分光光度法，是根据物质对不同波长的紫外线吸收程度不同...
求 怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量
答：1、280nm的光吸收法 用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法 核酸对紫外光有很强的吸收，在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克)，但核酸在260 nm处的吸收更强，其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm...
蛋白质含量的测定方法
答：这种方法是在280nm波长，直接测试蛋白。选择Warburg公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。从而显得结果很不稳定。蛋白质直接定量方法，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法...
bradford法测蛋白浓度怎么测?
答：测定：另取两支干净的试管（做一重复），加入合适浓度的待测样品，使其测定值在标准曲线的范围内，测定方法同上，由样品液的吸光度查标准曲线即可求出含量。注意事项：1、 如果要求严格，最好在试剂加入后的5~20min内测定光 吸收，因为这段时间内颜色是最稳定的。2、 若选择在旋涡混合器上混合，注意...
怎样用T6新世纪紫外分光光度计测蛋白质的含量
答：标准曲线的测定：取6支试管，按下表编号并加入BSA(1.0 mg/mL)0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，用蒸馏水补体积至5.0 mL；测定A280 ：用第1管为空白对照，各管溶液混匀后在紫外分光光度计上测定吸光度A280，以A280为纵坐标，各管的蛋白质浓度或蛋白质量(mg)为横坐标作图，标准曲线应为...
测定蛋白质含量的方法有哪些,其原理各是什么
答：取6支试管分别标号，前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，不加标准蛋白溶液，每支试管液体总量通过加入蒸馏水补足而保持一致。将液体混合均匀，在室温下放置30分钟，以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。
生物化学实验紫外法测定蛋白质含量中哪些不良操作会对实验结果产生影响...
答：【实验目的】1.掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理和方法 2.掌握紫外光分光光度计使用 【实验原理】蛋白质中含有酪氨酸、色氨酸等氨基酸残基，在紫外光280nm波长处有最大吸收峰，故可用280nm的光吸收值（即光密度的大小）来测定蛋白质的含量。由于核酸在280nm也有光吸收，对蛋白质的测定有干扰...
