培养基母液配制的方法如何 培养基中母液的配制有哪几种方法?

作者&投稿:皮侦 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
配制培养基是花卉组织培养的首要环节。培养基的成分随着花卉的种类、不同的外植体、不同的培养阶段应当有所不同。一般来说,各种培养基都有大量元素、微量元素、维生素、激素、糖和琼脂等物质,有时还要在培养基里添加有机附加物,如活性炭、香蕉汁、椰子汁等。在生产上,首先选用已有的培养基配方,它是前人研究的成果,又是经过生产实践验证的。现在几乎各种花卉用的营养基配方都有,可以免去您再研究的麻烦,当然在生产实践中,也可适当改进。如果您找不到合适的配方,可先试用MS培养基,MS是Murashige和Skoog的缩写,他们二人于1962年研究出来了这种培养基。下面以MS培养基为例,介绍怎样配制。
(1)配制母液。把培养基中的必需元素按原配方量的50倍、100倍或1 000倍称量后制成一种浓溶液,这种浓溶液叫母液。在配制培养基时按比例分别量取母液稀释到所需的浓度即可。母液配好后贴上标签,放在0~4℃的冰箱中,可使用半年到1年,这样做可节省许多时间。可能产生化学反应的或溶解后产生沉淀的,不能放在同一个容器中。配制母液要用重蒸馏水。药物要使用分析纯或等级较高的化学纯。药物的称量和药液的定容都要准确。
母液①:硫酸镁18.5克,硝酸铵82.5克,硝酸钾95.0克。加水定容到1000毫升,浓度为培养基的50倍,配1升培养基时量取20毫升母液。
母液②:氯化钙22.0克。加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。
母液③:磷酸二氢钾8.5克。加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。
母液④:乙二胺四乙酸二钠3.73克,硫酸亚铁2.78克。加水定容到1000毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。
母液⑤:硼酸620毫克,硫酸锰2230毫克,硫酸锌860毫克,硫酸铜2.5毫克,碘化钾83毫克,钼酸钠25毫克,氯化钴2.5毫克。加水定容到1000毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。
母液⑥:肌醇5克,甘氨酸100毫克,烟酸25毫克,盐酸吡哆醇25毫克,盐酸硫胺素5毫克。加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。
(2)配制培养基。配制每1000毫升培养基,称取6~10克琼脂作凝固剂,具体按配方要求称量,放在水浴锅上慢慢溶解。先在量筒内放入一定量的水,按照母液顺序和规定量,量取母液。当母液加完后,根据需要每升培养基再加入生长调节物质如吲哚乙酸或萘乙酸等,细胞分裂素类0.04~10毫克,细胞分裂素应用最多的是6-苄基腺嘌呤,加完后倒入已熔化的琼脂中。每1000毫升培养基加入蔗糖30克或根据要求确定,定容到所需的体积。继续加温,直到琼脂完全熔解。用盐酸或氢氧化钠对培养基的pH进行调节,多数培养基的pH在5.4~6.0之间,MS培养基的pH为5.7。
将配好的培养基趁热倒入培养容器中,培养基占容器体积的1/3~1/4。不要将培养基沾到容器壁上,否则容易被杂菌感染。然后及时加盖,进行高压灭菌,灭菌时要按高压灭菌锅的操作规程使用。在121℃、压力111千帕下维持15~20分钟,温度和时间都要严格控制。到时间后立即切断电源,当高压锅内压力降到常压后,开启放气阀,打开锅盖,取出灭菌好的培养基,放在接种室中培养3天,没被感染后才能用来组织培养。

一般配制成百倍浓度的。
譬如CoCl2溶液的培养基浓度是0.006%,那你就配制成0.6%的溶液,配制一升培养基的话取10ml即可。
通常我们的实际情况是同一个培养基需要配制多个母液,我们可以将多个微量元素配制在一起,然后在溶液里加几滴浓硫酸,保证母液的稳定性。
然后母液应该放在冰箱里4℃冷藏。最好是避光,譬如用棕色瓶分装或外裹一层牛皮纸。
使用时则尽量用干净无菌的吸管来移液,或者直接用移液器,枪头一般一次性使用。

培养基母液配制的方法如何~

一般配制成百倍浓度的。
譬如CoCl2溶液的培养基浓度是0.006%,那你就配制成0.6%的溶液,配制一升培养基的话取10ml即可。
通常我们的实际情况是同一个培养基需要配制多个母液,我们可以将多个微量元素配制在一起,然后在溶液里加几滴浓硫酸,保证母液的稳定性。
然后母液应该放在冰箱里4℃冷藏。最好是避光,譬如用棕色瓶分装或外裹一层牛皮纸。
使用时则尽量用干净无菌的吸管来移液,或者直接用移液器,枪头一般一次性使用。

培养基的配制应遵循一定的方法和程序,如果每次配制都要按着成分表依次称量,既费时,又增加了多次称量的误差。
为了提高配制培养基的工作效率,一般将常用的基本培养基先配制成10倍或100倍液或更高倍数的贮备液或母液(stocksolution)。
母液的配制常常有两种方法。一是将培养基的每个组分配成单一化合物母液,一是配成几种不同化合物的混合母液。
前者便于配制不同种类的培养基,后者在大量配制同种培养基时省时、省力。以MS培养基配制为例,说明母液配制过程中应注意的问题。该配方中除了蔗糖和琼脂外,还包括有19种成分,其中大多数化合物带有若干水分子,如果是用不同水分含量的同种化合物代替,则须重新计算其正确用量。通常配制四种贮备母液:大量元素(浓缩20倍)、微量元素(浓缩200倍)、铁盐(浓缩200倍)、除蔗糖外的有机物质(浓缩200倍)。在制备这几种母液时,要避免发生沉淀,通常把每种试剂单独溶解后(尤其是CaClsubscript2subscript,易与SOsuperscript2-superscriptsubscript4subscript、POsuperscript3-superscriptsubscript4subscript形成硫酸钙或磷酸钙的不溶物),再与别的也已经完全溶解的药品混合,混合已溶解的各种无机盐时还应注意先后顺序。Fesuperscript2+superscript易与某些阴离子形成沉淀而失效,故铁元素需单独配制成螯合铁母液。
各种生长调节物质的母液应分别配制,应先把它们溶解在很少量的适当溶剂中,可加热助溶,然后再加水定容。母液的浓度一般宜配制成1mmolL或10mmolL。

请介绍下胡萝卜组织培养的培养基配方?
答:这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。大量元素(母液Ⅰ) mg/L NH4NO3 33 000 KNO3 38 000 CaCl2·2H2O 8 800 MgSO4·7H2O 7 400 KH2PO4 3 400 微量元素(母液Ⅱ)...

月季的组织培养法是怎样的?
答:1.培养基的配制 在开始组织培养时,首先要配制培养基。目前最常用的月季培养基是MS培养基,其配方列于表4。表4 MS培养基配方 MS培养基母液的配制:为了更方便地配制培养基,要先配制比所需浓度高10~100倍的母液如表5,并用家用冰箱在0℃左右贮存备用。母液要按无机成分分别配制,以免发生化学反应或...

母液和工作液的配制技术
答:某些培养基因为其中所含成分的特殊性质(比如不耐热),需要与其他成分分开处理,此时这些特殊成分就要在后期加入,而其他可共同方便处理的成分就可以称之为母液或者基础。例如配置血琼脂培养基,其中的血液显然就是不能加热的,这时候就先配置好血琼脂基础,冷却到适当程度再加入脱纤维血。

培养基的配制方法 培养基的配制方法是什么
答:1、配制用水 培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的 双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。2、培养基 培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调...

高氏一号培养基配方
答:高氏一号培养基配方是KNO3 0.1g、K2HPO4 0.05g、MgSO4· 7H2O 0.05g、NaCl 0.05g、FeSO4· 7H2O 0.001g (母液)、灭菌 1.05kg/cm2,20min。配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量的沸水中,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其他成分,溶化后,补足水分到100ml,调...

培养基的配制
答:培养基配制注意事项:1、培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。2、PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。3、调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏...

植物组织培养中用到的多效唑(MET)0.5mg/ml母液怎么配制?
答:你也可以选择适当地扩大母液的浓度。在配制培养基的时间量取母液时算下该取多少ml就可以了。

植物组织培养可以培育新物种吗?
答:当然可以!但对某些植物不行!这是大多数植物组织培养的方法配制:1 MS培养基的配制包括以下步骤。培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液...

母液配置前称重物品应该
答:配制培养基最方便的方法是预先配制好不同组分的培养基母液,配成培养基配方使用浓度的10倍或100倍,甚至1000倍。这些母液包括无机盐、维生素以及在水溶液中稳定的生长调节物质等。平时应贮存在2-4℃冰箱内,待做培养基时取出,按比例稀释配用。母液的配制有两种方法:一种是配制成单一化合物母液;另一...

无土栽培的营养液怎么配制
答:1.首先要准备的原料为:大量元素、硝酸钾3克、硝酸钙5克、硫酸镁3克、磷酸铵2克、硫酸钾1克磷酸二氢钾1克。微量元素:(应用化学试剂)乙二胺四乙酸二钠100毫克;硫酸亚铁75毫克硼酸30毫克;硫酸锰20毫克;硫酸锌5毫克;硫酸铜1毫克;铝酸铵2毫克、自来水:5000毫升(5公斤)、配液瓶、搅拌棒。2...