将重组DNA导入细胞内有哪些方法?它们的原理是什么?

作者&投稿:伍依 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
【答案】:(1)将重组质粒导入原核细胞称转化,通常用氯化钙法使大肠杆菌细胞处于感受态,从而将外源DNA导入细胞。另一个常用方法是用脉冲高压电瞬间处理,使外源DNA高效导入细胞,称为电穿孔法。
(2)将重组体DNA包装成噬菌体,使外源基因导入宿主细胞称转导,在适宜条件下使转化率提高。
(3)将外源基因导入动物细胞常用方法有磷酸钙转染技术,电穿孔转染技术,脂质体载体法,DEAE-葡聚糖转染技术,显微注射法等。将外源基因导入植物细胞常用方法是用Ti质粒将外源基因导入植物的外植体,也可将植物细胞的细胞壁消化,再用将外源基因导入动物细胞常用方法将外源基因导入原生质体,再诱导产生细胞壁。还有一个方法,是用基因枪将外源DNA射入植物组织或细胞。

~

重组质粒是如何导入受体细胞的?
答:各种方法。一般大肠杆菌用CaCl2转染法。动物或植物可以采用脂质载体,基因枪,电击,显微注射,花粉管通道,病毒转染等方法

将外源基因导入原核细胞或真核细胞分别有哪些方法?
答:是除病毒载体转移方法之外的另一种有价值的体内基因转移方法。多用于体外转化细胞,或通过瘤组织内注射〔1〕进行体内转化,并已有少数临床应用的报告。目前常用的是阳离子脂质体(商品名为Lipofectin)。它可自发的与DNA形成复合物,保护外源DNA不被核酸酶降解,具有制备简单、安全无毒、无免疫原性、重复性、对...

由基因重组合载体到受体细胞中间过程的名称是?对动物细胞常用的方法是...
答:由基因重组合载体到受体细胞中间过程的名称是--转化 对动物细胞常用的方法是--转染,方法有物理的:电转;化学的:磷酸钙沉淀,脂质体转染;生物的:病毒介导。咱先理理概念。转染是包括于转化里面的。转化(英文transformation)即细胞通过摄取外源遗传物质(DNA或RNA)而发生遗传学改变的过程。动物细胞的...

将目的基因导入受体细胞的方法有那些?
答:DNA分子杂交技术:用同位素标记的目的基因片段作探针,与受体染色体DNA进行杂交。近年来研究者常采用PCR-Southern杂交技术,即先对被检测的材料进行PCR扩增,然后再用目的基因的同源探针与扩增产物进行杂交。再采用RT-PCR检测转录产物,即以受体总RNA或mRNA为模板进行逆转录合,然后再进行PCR扩增,如果得到特异...

重组DNA(基因工程)的主要步骤。
答:通过DNA连接酶进行连接,完成基因的重组过程。(3)将人工重组的DNA分子导入能进行正常复制的寄主细胞,从而得到复制:重组。DNA必须导入到宿主细胞中,随着宿主细胞的分裂而进行复制。(4)重组体分子的转化子克隆的选择和筛选:通过一定的方法进行重组子的筛选,常用的方法有蓝白斑筛选法和抗生素筛选法。

目的基因导入动物细胞的方法是什么?
答:目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法。导入的介质可以是质粒,也可以是动物病毒侵染。显微注射法是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组、缺失、复制或易位等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。

请教:基因治疗的问题:基因治疗中通过显微注射的重组DNA是如何在...
答:这些DNA在细胞内有两种可能,一是整合到染色体的DNA上表达,另一种可能是在细胞质基质中(它是加到运载体上才导入受体细胞的),至于表达过程就是中心法则那一套了。

分子克隆的基本方法
答:基因库的建造 特异基因的筛选 核酸序列测定 一、基因克隆的基本方法 一个典型的基因克隆实验,主要有以下操作和结果:(1)包括有目的基因在内的DNA片断插入另一个DNA分子(克隆载体,通常是环状的),形成重组DNA分子。(2)重组DNA分子通过转化或其他类似的方法被导入受体细胞。大肠杆菌是使用较多的受体...

什么是细胞重组,细胞重组的技术方法有哪些
答:细胞重组(cell reconstruction)是指从活细胞中将细胞器及其组分分离出来,再在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分重新组合,使之重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术。重组的主要方式 (1)胞质体与完整细胞的重组(胞质杂种)(2)微细胞与完整细胞的重组(微细胞异核体)(3)...

基因重组有什么操作?
答:用化学合成人工基因片段,是另一种比较简便的有效的方法。第二,是把含有目的基因的片段与载体(质粒或病毒)DNA分子重组在一起。第三,是把重组好的DNA分子导入宿主细胞。第四,让这些重组的DNA分子在细胞内与宿主的DNA组合在一起,让它表达出来,选育出含有所需要的重组DNA宿主细胞。对宿主细胞进行培育...