配置培养基的基本步骤有哪些？应注意什么问题 在配置培养基的过程中应注意哪些问题
1、常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净，晾干后备用。
（1）平皿用纸或布包好，或装在金属盒内，于121℃高压蒸汽菌3min后烘干，备用。
（2）试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好，再用布或报纸包扎好，121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干，备用。
（3）吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端（防止污染物吸出，或橡皮帽内的气体污染），然后用纸包后或装入金属吸管筒内，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。其他玻璃器皿均应按上法处理，也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后，备用。
2、培养基的制备及储存
（1）溶化：一般应放在玻璃器皿或搪瓷齐内。加入蒸馏水，隔水加热以促其溶解，加热时应经常搅拌，防止焦结，待其溶解后补足水分。
在使用干燥培养基时，先将蒸馏水按定量加入容器中，然后称取一定量培养基干粉放入水中，静置10—15min，搅拌，振荡，或延长时间以促进溶解，一般不要热，必要时加热，但时间不宜过长，温度不宜过高，避免某些营养成分被破坏。
（2）校正酸碱度（调节pH）：培养基必须有适当的pH。因此测定pH是培养基配制过程中的重要步骤之一，测定pH的标准温度为25士2℃。调节pH可用无菌的1mol/l氢氧化钠溶液或10%碳酸钠溶液、1mol/l盐酸溶液。当调节缓冲液的pH时，宜用6mol/l磷酸或10mol/l氢氧化钾溶液。灭菌后的pH会比灭菌前的pH升高或降低，一般高压灭菌前培养基的pH会比最终pH调高0.2左右，灭菌后基本合适。因此对培养基、缓冲液、试剂在灭菌前后的pH均进行测定，并记下每次pH的测定结果，有助于积累数据考察每种培养基、缓冲液、试剂对灭菌程序的耐受性，从而指导灭菌前pH的调节。干燥培养基一般已校正过pH，用时也必须再验证。测定时，一般用指示剂滴入培养基观察其颜色的变化，或用pH计校正，如与所需pH不符，可用以上的酸或碱液加以校正。调整pH后要加热过滤，使培养基澄清。( 更多质量检测、分析测试、化学计量、标准物质相关技术资料请参考中国标准物质 www.rmhot.com)
（3）培养基的分装：大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后，均要对分配器的管道系统进行冲洗，在分装无菌培养基前，则要采用无菌硅胶管。
固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中，高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。
平皿：倾注平皿，应在无菌室中放置3—4h，如用塑料平皿须在35℃培养箱 中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。
斜面：制备低层斜面分装于试管，约占容积1/5，灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上，使成斜度，分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基，如沾有培养基应用布抹去，以避免污染。
高层斜面：制备高层斜面分装于试管，约占试管容积的1/3，灭菌后趁热放置成高层短斜面，待其凝固后应用。
分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当天（2h内最佳）进行灭菌处理。液体、半固体培养基一般在高压灭前分装，约装试管容积的1/3，在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基，灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中。
培养基的灭菌：培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌，各种培养基的灭菌时间和压力，按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、103.42kPa灭菌15min，但容器和装量较大时，应延长至20min。含糖培养基115℃、68.85kPa灭菌30min。含糖、血清、 鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min，连续3d，间歇灭菌。血清或组织液，采用低热56—58水浴1h，连续5—6d灭菌，一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等，可用细菌过滤器，过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行，必须逐渐加热，彻底排除灭菌器内的空气，再逐渐升压保持预定的压力和时间，达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认，如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、68.85kPa灭菌30min为好。
通过无菌技术为测试制备的每一批培养基其PH在放冷至室温（25°）后，都应测定。一个扁平的pH计用于培养基表面pH值的测定，浸入式的pH计用于液体的测定。各供应商提供的培养基的pH应该在规定的±0.2的范围内，除非通过验证得到更宽的范围
注意：按配方计算培养基中各种成分的用量→称量,（一般动作要迅速一些,因为其中可能有些成分容易吸潮）→溶化（将称好的各种成分溶解在水中,如果是固体培养基,需要使用凝固剂,如琼脂等,熔化时,注意搅拌,防止糊底）→调pH→灭菌（高压蒸汽灭菌）→倒平板
1）确认培养基的成分,并精确称量；
2）加入各个成分的顺序；
3）准确调pH；
4) 适当的灭菌方法；
5）无菌条件下分装.
关于培养基配制，当然是注意浓度配比不要搞错，很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生，有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀,
不要忘了调节pH值（一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定）,加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质.
制备培养基中有哪些需要注意的点呢
快速制作斜面培养基方法
制作培养基斜面是制备菌种不可缺少的一步，传统的方法是将试管每10支为一组扎成一捆，高压灭菌后，一支一支地摆成斜面，操作比较烦琐，占用面积又多，造成诸多不便。我们在实践中摸索出一种简捷快速制备斜面培养基的方法，现介绍如下：
1．将胶合板截成长18厘米(与试管长度相等或略短)、宽9厘米(比并排5支试管直径的总和略窄)的小块备用。
2．在并排5支试管上面平置截好的胶合板，再在胶合板上面并排放5支试管，然后将试管的上、下端分别用牛皮纸包好，用线扎紧，使胶合板两侧的试管保持平行，置高压锅中灭菌。
3．高压灭菌后，经自然冷却，待气压降至零时，将高压锅的锅盖打开点，当棉塞水分充分蒸发后取出，不用拆捆，直接摆成斜面。大量制斜面时，既快捷又很少占用空间，非常方便，还便于保温，减缓凝结速度，充分吸收游离水分。
4．如需将斜面培养基保存一段时间，可在灭菌前将聚丙烯塑料袋套在试管外并扎紧袋口，灭菌后取出，直接摆成斜面，可防止水分蒸发。
吉林省梨树市农村成人中专，黎九贤，郭焕富，于爱红
摘自于2003年第7期《农村实用科技》
配制培养基的基本步骤有哪些?应注意什么问题~
按配方计算培养基中各种成分的用量→称量，（一般动作要迅速一些，因为其中可能有些成分容易吸潮）→溶化（将称好的各种成分溶解在水中，如果是固体培养基，需要使用凝固剂，如琼脂等，熔化时，注意搅拌，防止糊底）→调pH→灭菌（高压蒸汽灭菌）→倒平板
制备培养基中有哪些需要注意的点呢
在配制培养基的操作过程中应注意什么问题?
答：【答案】：(1)称量要准确，每称一个药品，换一次药匙或将药匙洗净擦干再用，严防药品混杂。(2)琼脂溶化过程中，应控制火力，以免培养基因沸腾而溢出容器。同时，需不断搅拌，避免琼脂糊底烧焦。(3)用精密pH试纸调pH。pH不要回头调，以免影响培养基内各离子的浓度。(4)注意不要使培养基染在管(瓶)...
配置培养基的基本步骤有哪些?应注意什么问题
答：在使用干燥培养基时，先将蒸馏水按定量加入容器中，然后称取一定量培养基干粉放入水中，静置10—15min，搅拌，振荡，或延长时间以促进溶解，一般不要热，必要时加热，但时间不宜过长，温度不宜过高，避免某些营养成分被破坏。（2）校正酸碱度（调节pH）：培养基必须有适当的pH。因此测定pH是培养基配制...
配制培养基的基本步骤有哪些?应注意什么问题
答：培养基 中各种 成分 的用量→称量，（一般动作要迅速一些，因为其中可能有些成分容易吸潮）→溶化（将称好的各种成分溶解 在水中 ，如果是 固体培养基 ，需要使用 凝固剂 ，如 琼脂 等，熔化时，注意搅拌，防止糊底）→调pH→灭菌（高压蒸汽灭菌）→倒平板 ...
配制培养基过程中应该注意什么问题
答：每灭菌前后（灭菌后至少一次）进行验证。3、有毒区域应严格与无毒区隔离，并应设置独立的空气净化系统和培养箱。毒性区应在无毒区保持相对负压，防止病毒污染培养细胞（特别是细胞库）。4、在基本培养基中加入抗生素，野生型菌株被杀死，营养缺陷型不能在基本培养基中生长而被保留下来。
配制培养基有哪几个步骤?在操作过程中应注意些什么问题?为什么?
答：1、选择适宜的营养物质 2、营养物质浓度及配比合适 3、控制pH条件 4、控制氧化还原电位(redox potential)5、原料来源的选择 6、灭菌处理
试述配制培养基的基本过程及应该注意的问题。(
答：配制培养基的基本过程包括以下几个步骤：首先，根据配方计算出培养基中各种成分的用量，并进行称量。这一步骤需要迅速进行，尤其是对于容易吸潮的成分。接下来，将称量好的各种成分溶解在水中。如果是固体培养基，还需要加入凝固剂，如琼脂等，并进行充分熔化。在熔化过程中，要注意不断搅拌，以防止糊底。...
配制培养基有哪几个步骤?在操作过程中应注意些什么问题?为什么?
答：1、选择适宜的营养物质 2、营养物质浓度及配比合适 3、控制pH条件 4、控制氧化还原电位(redox potential)5、原料来源的选择 6、灭菌处理
配置微生物培养基的过程中需要注意什么?
答：步骤：(一)准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。(二)校正pH值：将称量好的中海培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。(三)过滤：将玻璃...
如何配置培养基?
答：一、培养基配置的基础知识 培养基是细胞或微生物生长所需的营养物质的混合物。培养基的配置需要注意以下几个方面：1. 成分：培养基的成分必须满足细胞或微生物所需的营养物质。通常包括碳源、氮源、矿物质、维生素、生长因子和缓冲液等组分。2. pH值：培养基的pH值必须控制在适宜的范围内，以维持细胞或...
试述配制培养基的基本过程及应该注意的问题。(
答：加材料时需注意，因为培养不同的菌需要的物质不同；然后就是调节ph值；在灭菌过程中也需要注意，先是加水，要浸没电阻丝，三脚架平齐处，然后就是安全阀，排气阀的使用以及判断冷空气是否排尽等。关键操作是调ph 和灭菌。因为ph不同，会影响微生物的生长，再就是灭菌不完全，会有杂菌。
