在做荧光定量PCR时，PCR仪检测不到荧光信号，但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带，请问这是为什么？ 荧光定量pcr产物可以跑电泳吗
什么是实时荧光定量PCR，检测指标是什么？~
实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术，它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。
检测指标是：各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳，GoldView染色，检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。
原理：
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
可以的。
有时候，对结果不太自信的，可以跑琼脂糖电泳，厚一点。
在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有...
答：或者是你的PCR仪需要进行荧光校准（如果其他探针也没有信号的话），已经不能收集荧光信号了。或者是你的探针本身就有问题，合成的不好，信号很弱甚至没有信号。或者是你的探针存放时间太长，存放条件不好，导致探针已经降解。。。电泳有目的条带证明你的引物还是很好的，只是探针的问题或是荧光检测的问...
科普讲堂|实时荧光定量PCR检测方法
答：三、实时荧光PCR仪 实时荧光PCR系统包括热循环仪，用于荧光激发的光学系统以及用于收集荧光数据和管理分析的计算机软件，数据通过实时分析软件以图表的形式显示。
荧光定量pcr仪是怎样测试dna,rna的
答：荧光定量pcr仪是怎样测试dna，rna的 普通的基因扩增仪（PCR仪）只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多，而且运行成本也要低很多。不过不能直接得到扩增结果，还需要做电泳检测。实际中检测遗传疾病，品种分子标记筛选，甚至亲自鉴定等都可以由普通PCR仪完成。但是，某些需要定量的实验就必须用到...
荧光定量PCR仪中检测通道的激发光都是靠滤波片来完成的,假如光源为卤钨...
答：不同的激发光需要不同的滤波片，光源一般为氙灯或汞灯（光电转移效率高），卤素灯是用于明视场照明使用的（发热量高，产生的光子能量弱，对细胞没什么损伤，但不足以激发荧光）
荧光定量pcr仪可以测量荧光信号吗
答：肯定可以。其原理就是通过检测样品的荧光信号来探测扩增效果。因为荧光染料可以与双链DNA结合而产生荧光。
如何用双通道荧光定量PCR检测SNP
答：第一、你需要确定你的双通道的荧光定量PCR仪是否支持你所标记的这两种荧光燃料，就是它们的激发波长是否正好是你的PCR仪的滤光片检测波长；第二、确保你的引物之间扩增片断不要太大，最好是控制在200BP以内；第三、Taq酶最好是选择一种耐热性能更好的酶，因为这种反应对酶的质量要求更高一些，至于...
实时荧光定量pcr仪的技术原理
答：所谓real-time Q-PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基因，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在 real-time 技术的发展过程中，两个重要的发现起着关键的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的发现，它能降解特异性荧光记探针...
实时荧光定量PCR——RT-QPCR
答：罗氏LightCycler 480全自动实时定量PCR仪以及配套使用的48或96孔板；Thermo Scientific Arktik PCR仪、F1单道移液器、冰盒、QSP盒装吸头等 正式实验开始前，冰上解冻各个试剂【注意：SYBR Green I Master 需要避光放置】二、反转录 实验操作时注意：所有RNA相关的操作均需要佩戴手套，防止RNase污染。严格按照...
实时荧光定量PCR注意事项
答：1.按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率.开机顺序：先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件,进行实验.关机顺序：确认实验已经结束后,首先关闭信号收集软件,然后关掉定量PCR仪主机的电源,最后关闭电脑.2.应该...
怎样在荧光定量pcr仪上判读纯合还是杂合
答：对各个基因型采用不同颜色的探针，最后的结果类似于下图 这个实验基因型有两种，纯合子1型显示为蓝色，纯合子2型显示为红色，杂合子显示为绿色。
