请问一下,什么是菌液pcr?

作者&投稿:湛骆 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

菌液pcr是指菌液的聚合酶链式反应,是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。

PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。

DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。

扩展资料

转化的农杆菌R1000,EHA105,LBA4404 用碱裂解法提取表达载体pBTU质粒,筛选到转化子,计算转化率约为10~10。单菌落的菌体用特异引物进行PCR反应后扩增出目的基因,进一步证实直接从菌中扩增目的基因片段的方法是可行的。

经紫外分光光度计检测扩增产物的浓度为0.1~0.5μg/μl。试验发现某些已转化的单菌落质粒拷贝数少导致提取质粒困难,经PCR扩增反应后有些单菌落扩增出具有目的基因的转化子,可见 PCR扩增反应可快速鉴定出用质料提取方法无法确定出的转化子,提高了鉴定水平和效率。

参考资料来源:百度百科-PCR



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请问一下,什么是菌液pcr?
答:菌液pcr是指菌液的聚合酶链式反应,是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合...

什么是菌液pcr?
答:每个管中加入1ML培养基,用接种针挑取菌落接种于EP管中,摇菌几个小时,摇动EP管观察,如果发现有混浊即可用来PCR.我从一开始就用这一方法,非常 成功,省去了准备试管的时间,并且菌液存于有盖的EP管中,用来测序,冻存非常方便.在用接种针接种时很多人担心接种不上,...

菌液PCR原理是?
答:所以,严格来说,菌液PCR是细菌DNA的PCR。原理与DNA的PCR一样。先高温变性,使DNA解开双链,然后是中温退火,上游引物和下游引物分别与DNA单链的5‘及3’端结合,最后是延伸,即DNA开始复制为双链DNA。之后一直循环这个过程。设备齐全的话,直接把菌落加入菌液中,然后用机器设置。预变性时间要10~15...

菌液PCR是什么目的
答:菌液PCR 菌液PCR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于,直接以菌液作为模板。是一种可以快速鉴定菌液是否为含目的质粒的阳性菌液。操作简单,快接,阳性率较高,在转化鉴定中较常见。操作方法:1,挑取单个菌落,可以用高压灭菌的牙签。摇菌过夜培养。2,取培养的菌液2微升。3,按照菌中预期包含的质...

菌落PCR简介
答:方向特异性引物:结合特异性与方向性,适用于需要方向信息的平末端克隆。 PCR反应 - 以裂解菌液上清为模板,标准PCR反应设置,关键在于质粒DNA的释放和模板制备。 电泳分析 - 通过凝胶电泳解读产物大小,三种引物策略的预期结果各有不同。 接下来,让我们深入了解每个环节的技巧:PCR设置与模板...

菌液为什么能直接做PCR
答:其实是可以的,某些植物的叶子在氢氧化钠溶液中加热后也可以直接作为模板进行PCR的。

菌落PCR的具体方法
答:1、菌落PCR混合液(通俗称为pcr mix)的制备Taq buffer(10×) 180uldNTP(2.5 mM) 20~25 ulPrimer Forward(引物浓度在10Pmol) 5 ulPrimer Reverse(引物浓度在10Pmol) 5 ulddH2O 720 ulTaq(2U/ul) 12~15 ul2、常温下随机挑选平板内的单一菌落,用灭菌的牙签或枪头挑取单一菌落(...

什么叫pcr?它的基本原理是什么?
答:pcr需要的原料有:物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液。PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(...

什么是PCR技术PCR的基本原理是什么
答:PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度...

痰液pcr是什么意思?
答:痰液PCR是一种通过分子生物学技术从痰液中检测出特定的DNA或RNA序列的方法。PCR(聚合酶链反应)是一种快速增殖DNA或RNA的技术,在医学领域中被广泛应用。痰液PCR可以用于检测病毒、细菌、真菌等病原体的存在,对于感染性疾病的诊断有着重要作用。痰液PCR广泛应用于呼吸系统疾病的诊断和治疗。如肺结核、...