TAE的琼脂糖凝胶在TBE的缓冲液中电泳?是否可行? DNA电泳时,缓冲液的选择,何时用TAE,何时用TBE

作者&投稿:达涛 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
不好。TBE的特点是缓冲能力强,长时间电泳时可选用TBE,并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好

TAE 制胶要在TAE缓冲液里面跑,
TBE 制胶要在TBE缓冲液里面跑,两种缓冲液离子浓度不一样,不能混着用的。

简述tbe在琼脂糖凝胶电泳中的作用~

缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时阳极与阴极都会发生电解反应,阳极发生的是氧化反应,阴极发生的是还原反应,长时间的电泳将使阳极变酸,阴极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,使溶液两极的pH保持基本不变。
电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na离子,Na离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。
电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg离子等,防止电泳时激活DNA酶,此外还可防止Mg离子与核酸生成沉淀。



扩展资料
在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。
缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol·L⁻¹HAc和0.1mol·L⁻¹NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol·L⁻¹HAc和0.01mol·L⁻¹NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用。
组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH最小,缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算:
此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ(或pKbφ)两侧各一个pH单位之内。
参考资料来源:百度百科-缓冲液
参考资料来源:百度百科-电泳缓冲液

聚丙烯凝胶电泳(PAGE)适用于小片段(5~500bp),琼脂糖凝胶电泳适用的片段范围更大(200bp~50kb);PAGE的分辨能力强于琼脂糖,可分辨1~10bp的碱基差异。TBE的缓冲能力比TAE大,所以,PAGE选用TBE做缓冲液(让小片段跑得慢)。琼脂糖凝胶电泳选用两种缓冲液都可以,但两种情况下最好选TAE:1)电泳片段大于13kb的片段,2)切胶回收DNA(因为TBE会与琼脂糖反映形成四羟基硼酸复合物降低DNA片段的回收率)
琼脂糖凝胶电泳是水平的,PAGE是垂直的(垂直的胶加样孔与电泳方向一致,可以加更多的样)

琼脂糖凝胶电泳的原理什么
答:琼脂糖凝胶电泳的原理:琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法,这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物,利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应,达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电,在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于...

琼脂糖凝胶电泳具体操作步骤是什么?需要注意什么事项?
答:2、凝胶浓度 对于琼脂糖凝胶电泳,浓度通常在0.5~2%之间,低浓度的用来进行大片段核酸的电泳,高浓度的用来进行小片段分析。低浓度胶易碎,小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办法。3、缓冲液 常用的缓冲液有TAE和TBE,而TBE比TAE有着更好的缓冲能力。电泳时使用新制的缓冲液可以明显提高电泳效果。4...

琼脂糖凝胶怎么配制?
答:把琼脂糖,即几乎不含硫酸根的主要成分为多糖的琼脂,溶于热水,倒入玻璃杯中,冷却制成的凝胶。融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。即完成琼脂糖凝胶的配置。制成的小颗粒用于凝胶过滤,适于用sephadex不能分级分离的大分子的凝胶过滤,若使用5%以下浓度的凝胶,也能够分级分离细胞颗粒...

琼脂糖凝胶电泳用巴比妥缓冲液,你做时是怎么配置的,直接买试剂还是缓冲...
答:我没有使用过巴比妥缓冲液。我做琼脂糖凝胶电泳通常使用的是TAE或者TBE。这两种都是直接买10倍浓度溶液,用水稀释后使用。实验用溶液一概而论的话,技术上来说,买试剂自配和买配好的缓冲液无差别。实用中如果有卖缓冲液,买来直接用比较方便。一般也认为厂商大批量生产,质量控制较统一和稳定。买...

用琼脂糖凝胶电泳分析核酸(DNA和RNA)有哪些影响因素?
答:特别是TAE缓冲液,一般用2~3次就要更换,TBE缓冲液则可使用10次左右。实际工作中经常发现DNA 分子量标准小片段模糊不清,那足因为琼脂糖凝胶浓度一般不会超过2 0% ,较小的核酸片段在它的分辨范围之内,并且EB带正电荷,电泳时会向负傲移动,如果将凝胶置含EB(0.5#g/m1)的水溶液中30 min,...

pcr扩增产物在琼脂糖凝胶电泳缓冲液中带什么电荷
答:pcr扩增产物在琼脂糖凝胶电泳缓冲液中带负电荷。PCR扩增产物为双链DNA片段,在加有TBE缓冲液的琼脂糖凝胶中DNA分子带负电荷,因此在电泳过程中DNA分子会从阴极向阳极泳动,分子量大的DNA分子会比分子量小的DNA分子移动速度慢,从而实现不同分子量DNA片段的分离,电泳结束后用特异性核酸染料溴化乙锭染色,...

电泳实验中什么叫上样缓冲液
答:loading buffer 的中文名字叫上样缓冲液,6kb的缓冲液中可以显示两条带,前面的紫蓝色的条带是溴酚蓝,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同。后面的蓝色条带是二甲苯氰,它在1%和1.4%琼脂糖中电泳时,其迁移...

DNA电泳时,缓冲液的选择,何时用TAE,何时用TBE
答:聚丙烯凝胶电泳(PAGE)适用于小片段(5~500bp),琼脂糖凝胶电泳适用的片段范围更大(200bp~50kb);PAGE的分辨能力强于琼脂糖,可分辨1~10bp的碱基差异。TBE的缓冲能力比TAE大,所以,PAGE选用TBE做缓冲液(让小片段跑得慢)。琼脂糖凝胶电泳选用两种缓冲液都可以,但两种情况下最好选TAE:1)电泳...

琼脂糖的电泳技术
答:(1)凝胶类型用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。(2)缓冲液系统缺少离子时,电流太小...

什么是琼脂糖,由什么构成
答:DNA样品用适量Tris-EDTA缓冲液溶解,缓冲液内含有0.25%溴酚蓝或其他指示染料,含有10%-15%蔗糖或5%~10%甘油,以增加其比重,使样品集中。为避免蔗糖或甘油可能使电泳结果产生U形条带,可改用2.5%Ficoll(聚蔗糖)代替蔗糖或甘油。⑤ 电泳 琼脂糖凝胶分离大分子DNA实验条件的研究结果表明,在低浓度、...