实验室消毒方法有哪几种 实验室消毒灭菌方法

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根据不同的消毒对象采用不同的消毒方法,通常以采用机械清扫和冲洗与使用各种化学消毒剂相配合。
(1)大门
入口处设消毒槽。消毒药使用2%氢氧化钠(每周换一次)或新鲜生石灰。主要消毒车辆的轮胎。
(2)工人
工作人员在进入各生产车间前,必须在更衣室内脱衣,洗澡,换上经过消毒的工作衣裤,工作帽和胶靴,洗手后经消毒池进入车间。工作服、工作帽每周洗涤并高压消毒一次。
(3)猪舍
采用“全进全出”饲养方式的猪场,在引进猪群前,对空猪舍按以下程序彻底消毒:清除猪舍内的粪尿及垫料,运出作无害化处理,用高压水彻底冲洗顶棚、墙壁、门窗、地面及其他一切设施,直至洗涤液清澈透明为止。水洗干后关闭门窗,用福尔马林熏蒸消毒12~24小时,然后开窗通风24小时。消毒后空闲10~14天再使用。
(4)饲养管理用具
饲槽、饮水器及其他用具需每天洗刷,定期用1%~3%来苏儿或0.1%新洁尔灭消毒;垫料每周更换一次,并应事先消毒。

(一)物理消毒法
1.机械消毒
一般应用肥皂刷洗,流水冲净,可消除手上绝大部分甚至全部细菌,使用多层口罩可防止病原体自呼吸道排出或侵入.应用通风装置过滤器可使手术室、实验室及隔离病室的空气,保护无菌状态.
2.热力消毒
包括火烧、煮沸、流动蒸气、高热蒸气、干热灭菌等.能使病原体蛋白凝固变性,失去正常代谢机能.
(1)火烧
凡经济价值小的污染物,金属器械和尸体等均可用此法.简便经济、效果稳定.
(2)煮沸
耐煮物品及一般金属器械均用本法,100℃1~2分钟即完成消毒,但芽胞则须较长时间.炭疽杆菌芽胞须煮沸30分钟,破伤风芽胞需3小时,肉毒杆菌芽胞需6小时.金属器械消毒,加1~2%碳酸钠或0.5%软肥皂等碱性剂,可溶解脂肪,增强杀菌力.棉织物加1%肥皂水15l/kg,有消毒去污之功效.物品煮沸消毒时,不可超过容积3/4,应浸于水面下.注意留空隙,以利对流.
(3)流动蒸气消毒
相对湿度80~100%,温度近100℃,利用水蒸气在物何等表面凝聚,放出热能,杀灭病原体.并当蒸气凝聚收缩产生负压时,促进外层热蒸气进入补充,穿至物品深处,加速热量,促进消毒.
(4)高压蒸气灭菌
通常压力为98.066kPa,温度121~126℃,15~20分钟即能彻底杀灭细菌芽胞,适用于耐热、潮物品.
(5)干热灭菌
干热空气传导差,热容量小,穿透力弱,物体受热较慢.需160~170℃,1~2小时才能灭菌.适用于不能带水份的玻璃容器,金属器械等.不同病原体的热耐受力,以热死亡时间表达.
3.辐射消毒
有非电离辐射与电离辐射二种.前者有紫外线,红外线和微波,后者包括丙种射线的高能电子束(阴极射线).红外线和微波主要依靠产热杀菌.
电离辐射设备昂贵,对物品及人体有一定伤害,故使用较少.目前应用最多为紫外线,可引起细胞成份、特别是核酸、原浆蛋白和酸发生变化,导致微生物死亡.紫外线波长范围2100~3280A,杀灭微生物的波长为2000~3000A,以2500~2650A作用最强.对紫外线耐受力以真菌孢子最强,细菌芽胞次之,细菌繁殖体最弱,仅少数例外.紫外线穿透力差,3000A以下者不能透过2mm厚的普通玻璃.空气中尘埃及相对湿度可降低其杀菌效果.对水的穿透力随深度和浊度而降低.但因使用方便,对药品无损伤,故广泛用于空气及一般物品表面消毒.照射人体能发生皮肤红斑,紫外线眼炎和臭氧中毒等.故使用时人应避开或用相应的保护措施.
日光曝晒亦依靠其中的紫外线,但由于大气层中的散射和吸收使用,仅39%可达地面,故仅适用于耐力低的微生物,且须较长时间曝晒.此外过滤除菌除实验室应用外,仅换气的建筑中,可采用空气过滤,故一般消毒工作难以应用.
(二)化学消毒法
根据对病原体蛋白质作用,分为以下几类.
1.凝固蛋白消毒剂包括酚类、酸类和醇类.
(1)酚类
主要有酚、来苏、六氯酚等.具有特殊气味,杀菌力有限.可使纺织品变色,橡胶类物品变脆,对皮肤有一定的刺激,故除来苏外应用者较少.酚(石炭酸)(carbolic acid):无色结晶,有特殊臭味,受潮呈粉红色,但消毒力不减.为细胞原浆毒,对细菌繁殖型1:80~1:110溶液,20℃30分钟可杀死,但不能杀灭芽胞和抵抗力强的病毒.加肥皂可皂化脂肪,溶解蛋白质,促进其渗透,加强消毒效应,但毒性较大,对皮肤有刺激性,具有恶臭,不能用于皮肤消毒.来苏(煤酚皂液)(lysol):以47.5%甲酚和钾皂配成.红褐色,易溶于水,有去污作用,杀菌力较石炭酚强2~5倍.常用为2~5%水溶液,可用于喷洒、擦试、浸泡容器及洗手等.细菌繁殖型10~15分钟可杀灭,对芽胞效果较差.六氯酚(hexochlorophane):为双酚化合物,微溶于水,易溶于醇、酯、醚,加碱或肥皂可促进溶解,毒性和刺激性较少,但杀菌力较强.主要用于皮肤消毒.以2.5~3%六氯酚肥皂洗手可减少皮肤细菌80~90%,有报告可产生神经损害,故有宜长期使用.
(2)酸类
对细菌繁殖体及芽胞均有杀灭作用.但易损伤物品,故一般不用于居室消毒.5%盐酸可消毒洗涤食具,水果,加15%食盐于2.5%溶液可消毒皮毛及皮革,10l/kg加热30℃浸泡40小时.乳酸常用于空气消毒,100m3空间用10g乳酸薰蒸30分钟,即可杀死葡萄球菌及流感病毒.
(3)醇类乙醇(酒精)
75%浓度可迅速杀灭细菌繁殖型,对一般病毒作用较慢,对肝炎病毒作用不肯定,对真菌孢子有一定杀灭作用,对芽胞无作用.用于皮肤消毒和体温计浸泡消毒.因不能杀灭芽胞,故不能用于手术器械浸泡消毒.异丙醇(isopropylalcohol)对细菌杀灭能力大于2.溶解蛋白消毒剂
主要为碱性药物,常用有氢氧化钠、石灰等.
(1)氯氧化钠
白色结晶,易溶于水,杀菌力强,2~4%溶液能杀灭病毒及细菌繁殖型,10%溶液能杀灭结核杆菌,30%溶液能于10分钟杀灭芽胞,因腐蚀性强,故极少使用,仅用于消灭炭疽菌芽胞.
(2)石灰
遇水可产生高温并溶解蛋白质,杀灭病原体.常用10~20%石灰乳消毒排泄物,用量须2倍于排泄物,搅拌后作用4~5小时.20%石灰乳用于消毒炭疽菌污染场所,每4~6小时喷洒一次,连续2~3次.刷墙2次可杀灭结核芽胞杆菌.因性质不稳定,故应用时应新鲜配制.
3.氧化蛋白类消毒剂
包括含氯消毒剂和过氧化物类消毒剂.因消毒力强,故目前在医疗防疫工作中应用最广.
(1)漂白粉
应用最广.主要成分为次氯酸钙[Ca(OCl)2],含有效25~30%,性质不稳定,可为光、热、潮湿及CO2所分解.故应密闭保存于阴暗干燥处,时间不超过1年.有效成份次氯酸可渗入细胞内,氧化细胞酶的硫氢基因,破坏胞浆代谢.酸性环境中杀菌力强而迅速,高浓度能杀死芽胞,粉剂中用于粪、痰、脓液等的消毒.每升加干粉200克,搅拌均匀,放置1~2小叶,尿每升加干粉5克,放置10分钟即可.10~20%乳剂除消毒排泄物和分泌物外,可用以喷洒厕所,污染的车辆等.如存放日久,应测实际有效氯含量,校正配制用量.漂白粉精的粉剂和片剂含有效氯可达60~70%,使用时可按比例减量.
(2)氯胺—T
为有机氯消毒剂,含有效氯24~26%,性较稳定,密闭保持1年,仅丧失有效氯0.1%.微溶于水(12%),刺激性和腐蚀性较小,作用较次氯酸缓慢.0.2%1小时可杀灭细菌繁殖型,5%2小时可杀灭结核杆菌,杀灭芽胞需10小时以上.各种铵盐可促进其杀菌作用.1~2.5%溶液对肝炎病毒亦有作用.活性液体须用前1~2小时配制,时间过久,杀菌作用降低.
(3)二氯异氰尿酸钠
又名优氯净,为应用较广的有机氯消毒剂,含氯60~64.5%.具有高效、广谱、稳定、溶解度高、毒性低等优点.水溶液可用于喷洒、浸泡、擦沫,亦可用干粉直接消毒污染物,处理粪便等排泄物,用法同漂白粉.直接喷洒地面,剂量为10~20g/m2.与多聚甲醛干粉混合点燃,气体可用薰蒸消毒,可与92号混凝剂(羟基氯化铝为基础加铁粉、硫酸、双氧水等合成)以1:4混合成为“遇水清”,作饮水消毒用.并可与磺酸钠配制成各种消毒洗涤液,如涤静美,优氯净等.对肝炎病毒有杀灭作用.此外有氯化磷酸三钠、氯溴二氰尿酸等效用相同.
(4)过氧乙酸
亦名过氧醋酸,为无色透明液体,易挥发有刺激性酸味,是一种同效速效消毒剂,易溶于水和乙醇等有机溶剂,具有漂白的腐蚀作用,易挥发的刺激性酸味,是一种高效速效消毒剂,易溶于水和乙醇等有机溶剂,具有漂白和腐蚀作用,性不稳定,遇热、有机物,重金属离子、强大碱等易分解.0.01~0.5%,0.5~10分钟可杀灭细菌繁殖体,1%5分钟可杀灭芽胞,常用浓度为0.5~2%,可通过浸泡、喷洒、擦抹等方法进行消毒,在密闭条件下进行气雾(5%浓度,2.5ml/m2)和熏蒸(0.75~1.0g/m3)消毒.

 (一)明确消毒的主要对象

  应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类,有针对性地使用消毒剂。

  (二)采取适当的消毒方法

  根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。

  医院诊疗器械按污染后可造成的危害程度和在人体接触部位不同分为三类:

  1.高度的器材:穿过皮肤、粘膜而进入无菌的组织或器官内部,或与破损的皮肤粘膜密切接触的器材,如手术器械、注射器、心脏起搏器等。必须选用高效消毒法(灭菌)。

  2.中度的器材:仅与皮肤、粘膜密切接触,而不进入无菌组织内,如内窥镜、体温计、氧气管、呼吸机及所属器械、麻醉器械等。应选用中效消毒法,杀灭除芽胞以外的各种微生物。

  3.低度器材和物品:不进入人体组织,不接触粘膜,仅直接或间接地与健康无损的皮肤接触,如果没有足够数量的病原微生物污染,一般并无危害,如口罩、衣被、药杯等,应选用低效消毒法或只作一般卫生处理。只要求去除一般细菌繁殖体和亲脂病毒。

  (三)控制影响消毒效果的因素许多因素会影响消毒剂的作用,而且各种消毒剂对这些因素的性差异很大。

  1.微生物的种类

  不同类型的病原微生物对消毒剂抵抗力不同,因此,进行消毒时必须区别对待。

  (1)细菌繁殖体:易被消毒剂消灭,一般革蓝氏阳性细菌对消毒剂较,革蓝氏阴性杆菌则常有较强的抵抗力。繁殖体对热,消毒方法以热力消毒为主。

  (2)细菌芽胞:芽胞对消毒因子耐力最强,杀灭细菌芽胞最可靠的方法是热力灭菌,电离辐射和环氧乙烷熏蒸法。在化学消毒剂中,戊二醛、过氧乙酸能杀灭芽胞,但可靠性不如热力灭菌法。

  (3)病毒:对消毒因子的耐力因种类不同而有很大差异,亲水病毒的耐力较亲脂病毒强。

  (4)真菌:对干燥、日光、紫外线以及多数化学药物耐力较强,但不耐热。

  2.微生物的数量

  污染的微生物数量越多需要消毒的时间就越长,剂量越大。

  3.有机物的存在

  ①有机物在微生物的表面形成层妨碍消毒剂与微生物的接触或延迟消毒剂的作用,以致于微生物逐渐产生对药物的适应性。②有机物和消毒剂作用,形成溶解度比原来更低或杀菌作用比原来更弱的化合物。③一部分消毒剂与有机物发生了作用,则对微生物的作用浓度降低。④有机物可中和一部分消毒剂。消毒剂中重金属类、表面活化剂等受有机物影响较大,对戊二醛影响较小。

  4.温度

  随着温度的升高,杀菌作用增强,但温度的变化对各种消毒剂影响不同。如甲醛、戊二醛、环氧乙烷的湿度升高1倍时,杀菌效果可增加10倍。而酚类和酒精受温度影响小。

  5.PH值

  从两方面影响杀菌作用。①对消毒剂的作用:改变其溶解度和结构。②pH过高或过低对微生物的生长均有影响。在酸性条件下,细菌表面负电荷减少,阴离子型消毒剂杀菌效果好。在碱性条件下,细菌表面负电荷增多,有利于阳离子型消毒剂发挥作用。

  6.处理剂量与监测

  消毒、灭菌处理的剂量,加强效果监测,防止再污染。

  二、灭菌技术

  (一)高压蒸汽灭菌法的注意事项

  第一,无菌包不宜过大(小于50cm×30cm×30cm),不宜过紧,各包裹间要有间隙,使蒸汽能对流易渗透到包裹中央。消毒前,打开贮槽或盒的通气孔,有利于蒸汽流通。而且排气时使蒸汽能迅速排出,以保持物品干燥。消毒灭菌完毕,关闭贮槽或盒的通气孔,以保持物品的无菌状态。

  第二,布类物品应放在金属类物品上,否则蒸汽遇冷凝聚成水珠,使包布受潮。阻碍蒸汽进入包裹中央,严重影响灭菌效果。

  第三,定期检查灭菌效果。经高压蒸汽灭菌的无菌包、无菌容器有效期以1周为宜。



实验室常用的三种消毒方法~

煮沸消毒:在100°C煮沸5~6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢
巴氏消毒(对于不耐高温的液体):在70~75°C煮30min或在80°C煮15min
化学药剂消毒
紫外线消毒

实用的科学知识:这些都是实验室里常用的消毒和灭菌方法哦

实验室常用的三种消毒方法
答:煮沸消毒:在100°C煮沸5~6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢 巴氏消毒(对于不耐高温的液体):在70~75°C煮30min或在80°C煮15min 化学药剂消毒 紫外线消毒

实验室常用的消毒灭菌方法有哪些?(回答出3种即可)
答:物理消毒法包括火焰灭菌、煮沸消毒、高压蒸汽灭菌、紫外线照射和过滤除菌等。火焰灭菌主要适用于金属接种工具,通过直接灼烧来迅速彻底地灭菌。煮沸消毒通常用于杀灭液体中的病原体,将待灭菌物置于沸水中煮沸30-60分钟。高压蒸汽灭菌是实验室常用的灭菌方法,通过高温高压杀灭包括芽胞在内的所有微生物。紫外...

消毒有哪几种方法
答:比较常用的有五种 (一)热力灭菌法 热力能破坏微生物的蛋白质和核酸,使蛋白质变性凝固,核酸解链崩裂,从而导致其死亡。1.干热灭菌法 常用焚烧、烧灼和干烤等方法。(1)焚烧与烧灼 焚烧仅用于废弃的被病原微生物污染的物品、垃圾、人及动物尸体等。烧灼用于微生物实验室的接种环、金属器械、试管口、...

实验室消毒方法有哪几种
答:根据不同的消毒对象采用不同的消毒方法,通常以采用机械清扫和冲洗与使用各种化学消毒剂相配合。(1)大门 入口处设消毒槽。消毒药使用2%氢氧化钠(每周换一次)或新鲜生石灰。主要消毒车辆的轮胎。(2)工人 工作人员在进入各生产车间前,必须在更衣室内脱衣,洗澡,换上经过消毒的工作衣裤,工作帽和...

实验室仪器设备消毒杀菌的方法有哪些
答:时间不足达不到灭菌效果,时间过长培养基里面的化学物质遭到破坏。影响培养基成本。3、射线灭菌法,利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。紫外线是一种低能量的电磁辐射,可以杀灭多种微生物。紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。缺...

微生物学实验室常用的灭菌方法有哪些
答:b.干热空气灭菌法:这是实验室中常用的一种方法,即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中,升温至160℃,恒温1小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。2 湿热灭菌法:在同样的温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好,这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高,容易变性。另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高...

实验室消毒方法
答:实验室消毒手段主要包括紫外线法和臭氧发生器消毒法。紫外线是一种低能电磁辐射,尤其对革兰阴性菌有显著灭杀效果,其次是革兰阳性菌,芽孢和真菌孢子的抵抗力较强。紫外线消毒的原理是破坏微生物的核酸和蛋白质,直接和间接作用均可达到杀菌目的。常见的消毒方式是使用紫外线灯照射空气、地面和工作台表面...

实验室消毒灭菌方法
答:实验室常用的消毒灭菌方法 一、消毒技术(一)明确消毒的主要对象 应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类,有针对性地使用消毒剂。(二)采取适当的消毒方法 根据消毒对象选择简便 一、消毒技术 (一)明确消毒的主要对象 应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类...

实验室常用消毒灭菌方法
答:1. 高压蒸汽灭菌法:通过高温和高压的组合来灭菌,这种方法不仅能消灭一般细菌,还能有效杀灭细菌芽胞。因此,它被认为是物理灭菌中最可靠且最广泛应用的方法。它主要适用于那些能够承受高温的物品,包括金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶以及其他一些药物的灭菌。

实验室灭菌消毒怎么做更彻底?
答:二、高温灭菌法 高温灭菌法是利用高温使微生物的蛋白质及酶发生凝固或变性而死亡,是应用最广泛且有效的灭菌方法。主要用于器械、容器、试剂等灭菌。 (一)高压蒸气灭菌法 图为实验室常用的高压灭菌锅 (右图来自《微生物实验》一书) 用高温加高压灭菌,不仅可杀死一般的细菌,对细菌芽胞也有杀灭效果,是最可靠、应用最...