TE用量多了会不会影响PCR反应 用TE溶解的DNA会干扰后续的PCR反应吗？我要做克隆测序。
TE用量多了会不会影响PCR反应
是的，EDTA会螯合镁从而抑制反应。Tris倒是不那么关键。
DNA用TE缓冲液保存,之后做PCR,会对PCR产生影响吗?~
不会。反而不能用双蒸水保存DNA，DNA在双蒸水中因为没有足够的离子而容易变性。只有像引物这样小片段、单链的DNA片段可以用水保存
TE里面DNA会很稳定，这个是肯定的。但是，TE里面有EDTA，会螯合有些金属离子，而PCR国产会需要金属离子，则会影响。
但是，同时你要注意，你溶解的DNA在PCR时，取样量是很小的，这个时候，TE影响不大。
影响PCR反应效率的因素有哪些?如何有效地提高PCR反应的效率?
答：4. 影响PCR特异性的因素：退火步骤的严格性、减短退火和延伸时间、降低引物和酶的浓度、改变MgCl2浓度以及模板中存在的次级结构等都会影响PCR的特异性。5. 扩增平坡：扩增反应在一定循环周期后进入平坡，这是由于底物过剩、非特异性扩增产物的竞争、退火时产物的单链自己缔合以及变性不完全等因素造成的。...
pcr的关键性技术
答：④引物设计不合理,如引物长度不够,引物之间形成二聚体等。 Mg2+浓度:Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特 异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。 反应体积的改变:通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul,应用多 大体积进行PCR扩增,是根据科研...
荧光定量pcr的扩增效率e多少算好
答：ABI的仪器是接近100%最好，罗氏的是接近2最好，这个要看具体的机型。但是数值的表示当时可能不一样，但是换算之后肯定都是接近100%最好。也就是每一轮扩增循环后，产物的量加倍
PCR反应中DNA模板的量比原计划多加了会怎样
答：没什么影响~但是不能太多~模板正常量要尽量少~毕竟PCR是指数扩增~
请问大神,在DNA的PCR扩增反应中加入过量的Taq酶会不会发生什么严重的后...
答：正常情况下如果酶量偏高则会出现很多非特异性扩增，比如引物二聚体、非目的片段等，跑胶的时候也会出现很多乱七八糟的条带，但是如果酶量非常的多，则会对反应产生抑制作用，就像可逆反应一样，酶量太多会抑制反应的正向进行，严重的时候甚至没有目的条带，加酶的时候尽量按照产品说明书去配，这样可以...
pcr中引物设计为什么不能有过多的c和d
答：引物中包含过多的C和G碱基对会导致一些问题，例如：1、引物中过多的C和G碱基对会导致引物间形成二聚体或多聚体。这种情况下，引物会在PCR反应开始前就互相结合，形成引物二聚体或多聚体，而不是与模板DNA结合。这将导致PCR反应效率的下降或完全失败。2、引物中过多的A和T碱基对会导致非特异性扩增...
进行分子实验时,如酶切反应、PCR扩增等,加入酶时应注意哪些问题?_百度...
答：冰上操作，充分混匀，控制用量，控制反应时间 冰上操作：使用过程中注意对酶的保护，以免失活 充分混匀：充分混匀才能使酶充分发挥作用 控制用量：过多的酶会导致星活性（比如用限制性内切酶的酶切实验），即酶切错误；PCR中酶加得过多也容易导致非特异扩增 控制反应时间：根据具体的酶、具体的实验确定...
做定点突变PCR时,如果模板加多了,会怎么样?
答：运气没那么背。现在你是模板多加了一点，那其实完全可以在后续的步骤中补救；比如你做了25μl体系的突变PCR，那么除去取5-10μl跑个电泳确认突变引物P成功了，剩下的15μl你可以少取点(比如5μl)进行DpnI消解，并且可以增加DpnI酶的用量和反应时间，这些都可以增加完全消解模板的几率。
PCR实验操作注意事项有哪些
答：1、必须拥有标准的的PCR荧光实验室。2、检测设备必须符合标准PCR荧光实验室设置要求 荧光定量PCR仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件，构成PCR-DNA/RNA实时荧光定量检测系统。3、必须通过国家临床检验中心的验收和认证。4、检测人员必须通过国家临检中心业务培训并取得合格证书;PCR实验室内工作人员必须...
PCR的注意事项
答：Mg2+浓度：Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低PCR扩增的特异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。反应体积的改变：通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul，应用多大体积进行PCR扩增，是根据科研和临床检测不同目的而设定，在做小体积如20ul后...
