下图A为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图B为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。 图中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图甲、图乙中箭头表...

作者&投稿:丛瑞 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
您好!请注意:图中灰色部分为荧光素酶基因编码区,而BamH I的酶切位点位于编码区内,如果使用BamH 1会切断荧光素酶的编码区,无法获得完整的目标基因(荧光素酶基因);Sma I产生的切口没有粘性末端(亦称墩性末端),无法用于重组。您确定答案只有 Msp I吗?一般在获取一个目的基因时,至少要有一种以上的酶去切,才能获得一个目的基因,所以最应选择的酶是 Msp I和Mbo I(充分必要条件),因为光有 Msp I只能把前面那段无用的DNA切掉,而Mbo I后面的部分还在,也必须用Mbo I切掉,才算获得目的基因。还不懂可追问!

  想把荧光素酶基因切出来,至少需要两个酶切位点,一个切上游,一个切下游。以本题为例,BamHI在基因中间不能用,想切出荧光素酶基因要么需要MspI+MboI,要么需要MspI+SmaI。只用MspI怎么能把荧光素酶基因切出来呢?

如表所示列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点.下列说法错误~

A、质粒切割前是双链环状DNA分子,所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键,故不含游离的磷酸基团.从图1可以看出,质粒上只含有一个SmaⅠ的切点,因此被该酶切割后,质粒变为线性双链DNA分子,因每条链上含有一个游离的磷酸基团,因此切割后含有两个游离的磷酸基团,A错误;B、基因表达载体必须具备目的基因、启动子、终止子、标记基因,图中质粒的标记基因为抗生素抗性基因,而Sma I的切割位点就在该基因上,因此用质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma I切割,B正确;C、由于同种限制酶切割形成的黏性末端相同,图2中为防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状,不能使用EcoRⅠ,C正确;D、使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA,各自会有不同黏性末端,能防止自身环化,D正确.故选:A.

A、基因表达载体必须具备目的基因、启动子、终止子、标记基因,图中质粒的标记基因为抗生素抗性基因,而Sma I的切割位点就在该基因上,因此用质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma I切割,故A正确;B、质粒切割前是双链环状DNA分子,所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键,故不含游离的磷酸基团.从图甲可以看出,质粒上只含有一个SmaⅠ的切点,因此被该酶切割后,质粒变为线性双链DNA分子,因每条链上含有一个游离的磷酸基团,因此切割后含有两个游离的磷酸基团,故B错误;C、质粒和目的基因连接后获得重组质粒,该过程需要连接酶作用,故混合后加入DNA连接酶,故C错误;D、只使用EcoR I,则质粒和目的基因两端的粘性末端相同,用连接酶连接时,会产生质粒和目的基因自身连接物,而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切时,在目的基因上只有一个酶切位点,因此不能切割目的基因,故D错误.故选A.

下图A为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图B为含有荧光素酶基因的DNA...
答:您好!请注意:图中灰色部分为荧光素酶基因编码区,而BamH I的酶切位点位于编码区内,如果使用BamH 1会切断荧光素酶的编码区,无法获得完整的目标基因(荧光素酶基因);Sma I产生的切口没有粘性末端(亦称墩性末端),无法用于重组。您确定答案只有 Msp I吗?一般在获取一个目的基因时,至少要有一...

...DNA分子上特定的核苷酸碱基序列.下图为四种限制酶BamHI,EcoRI,H...
答:限制酶所识别的是特定的碱基序列,并在特定部位进行切割,不同的限制酶识别不同的核苷酸序列并识别不同的切点,黏性末端不同.但不同的粘性末端有时是可以进行拼接的,只要切下的游离碱基互补即可互补黏合,由图示可知BamHI和BglII都可切下序列-GATC-,故末端互补序列-GATC-,故D正确.故选:D.

下面是4种限制酶所识别的DNA分子序列和剪切位点图(↓表示切点、切出的...
答:解答:A.限制性核酸内切酶1和2切出的DNA片段的黏性末端不同,限制酶1剪切出的黏性末端都是GATC,酶2是GTAC,故A错误;B.在使用限制性核酸内切酶时,不需要解旋酶,限制酶切割磷酸二酯键,解旋酶使得氢键断裂,故B错误;C、限制性核酸内切酶1、2识别的序列都是由4个脱氧核苷酸组成,限制性核酸内切酶...

...切割DNA分子上特定的核苷酸序列.如图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、H...
答:DNA黏性末端可以互补配对需具备互补的碱基序列,即相同的黏性末端,根据图示可知BamHI和BglII切割形成的黏性末端都是-GATC,可以互补配对.故选:C.

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关...
答:目的基因和标记基因中都有SmaⅠ酶切割序列,如用SmaⅠ酶会破坏目的基因和标记基因.(4)如只使用EcoRⅠ酶切割,会形成相同的黏性末端,可能出现质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化.(5)DNA连接酶可将目的基因与质粒连接起来形成重组DNA.(6)重组质粒中抗生素抗性基因是标记基因,作用是为了鉴别和...

下面是5种限制性内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图(↓表示剪切...
答:A、限制酶4识别的序列包含6个碱基对,A错误;B、限制酶3识别的序列包含6个碱基对,B错误;C、限制酶1和3剪出的粘性末端相同,均为GATC,C正确;D、限制酶1和2剪出的黏性末端不同,D错误.故选:C.

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点.如图是转基因抗病香蕉的培...
答:(1)质粒抗生素抗性基因为标记基因,由图可知,标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位点,都可以被SmaI酶破环,故不能使用该酶剪切质粒和含有目的基因的DNA.(2)标记基因和外源DNA目的基因中均含有EcoRⅠ酶切位点,在DNA连接酶的作用下,可形成3种环状产物,即外源DNA自身连接、质粒自身连接、...

图中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图甲、图乙中箭头表示相关限...
答:A、基因表达载体必须具备目的基因、启动子、终止子、标记基因,图中质粒的标记基因为抗生素抗性基因,而Sma I的切割位点就在该基因上,因此用质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma I切割,故A正确;B、质粒切割前是双链环状DNA分子,所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键,故不含游离的磷酸基团.从图甲...

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关...
答:图中有两个MspⅠ酶切位点,1个KpnⅠ位点,同时1个SmaⅠ位点也能被MspⅠ酶切,所以共有4个位点,切割成4个片段.(5)根据题意,为获取T1噬菌体抗性基因,所以将大肠杆菌培养在含有T1噬菌体的培养基中,敏感的大肠杆菌死亡,导入抗性基因的大肠杆菌存活.故答案为:(1)温度、PH (2)不能 Ms...

限制酶的识别序列问题
答:一种限制酶可能识别不止一种DNA序列,如 AccⅠ 识别的序列是 GT↓MKAC ,也就是说可识别 4 种序列,其中两种是对称的,另两种是非对称的。 HindⅡ 识别的序列是 GTY↓RAC 。同一段DNA序列可能被不止一种限制酶识别,切割位点也可能不同。限制酶识别序列的长度一般为 4-8 个碱基,最常见的为 ...