细胞苗组织苗 组织培养有什么优点和缺点？
福州大北农生物技术有限公司
(1广西大学动科院，广西南宁，530005； 2广西兽医研究所，广西南宁，530001 )
犊牛睾丸细胞培养冻干苗自70年代问世以来，对猪瘟的预防起到了极其重要的作用。尽管我国目前普遍使用这种疫苗，但许多地区仍发生不同程度的猪瘟疫苗免疫失败。对此有人认为是猪瘟流行株抗原发生了变异，使疫苗不能很好的保护猪体抵抗强毒攻击；也有人认为是由猪瘟疫苗质量问题所导致。为此，我们自1998年以来，在广西部分猪场开展猪瘟抗体水平监测，结果发现猪瘟抗体水平普遍偏低，部分猪场使用猪瘟细胞苗免疫后，仍发生猪瘟，造成仔猪成活率较低。为了给生产单位选择一种更有效的疫苗或免疫方式。本试验选择猪瘟组织苗与细胞苗进行对比试验，并对这几年的猪瘟抗体水平进行统计分析，以期找到消灭或减少猪瘟发生的方法，兹将试验及调查统计结果报告如下。
1、材料与方法
1.1疫苗：犊牛睾丸细胞培养冻干苗(细胞苗)，按部颁标准方法生产，由某公司提供。猪瘟兔化弱毒兔体组织苗(组织苗)：由解放军军需大学提供。
1.2 诊断试剂：猪瘟正向间接血凝试剂，由兰州兽医研究所提供。
1.3 试验分组及免疫方法：选择位于南宁、贵港、扶绥三个地区有代表性的三个大猪场(这三个猪场自1998年以来都有不同程度的猪瘟存在)，每个猪场随机抽取20头仔猪和20头母猪，其中取10头母猪和10头仔猪以细胞苗免疫，另10头母猪和10头仔猪用组织苗免疫。免疫方法同为在母猪配种前5天，用细胞苗4头份(即600个兔感染量)，组织苗1头份(即150个兔感染量)免疫母猪。母猪产下的仔猪，分别在5、10、 15、 25日龄采血，分离血清检测抗体，母猪在断奶后采血检测。
1 .4 抗体检测方法：按猪瘟正向间接血凝试剂盒说明书讲行。
1.5 部分猪场猪瘟抗体水平的监测及仔猪成活率的统计：将98年以来用细胞苗免疫及2000年以来用组织苗免疫的8个猪场的抗体水平监测结果进行统计分析，并对南宁、贵港、扶绥三个地区猪场98-2002年间仔猪成活率进行统计比较，以求进一步从整体水平上比较细胞苗与组织苗的免疫效果。
2、结果
2. 1 两种疫苗免疫后母猪的抗体水平与仔猪获得母源抗体水平的比较：我们将南宁、贵港、扶绥三个猪场猪瘟抗体水平检测结果汇总，结果见表1（表1略，编者）。由表1可见以4头份细胞苗及1头份组织苗免疫的母猪，待仔猪断奶时，其抗体水平均在保护线之上(1∶16)，其中以组织苗免疫产生的抗体水平较整齐，1∶64、1∶128各占70% (21/30)和26.7% (8/30)，而细胞苗免疫产生的抗体水平不整齐，范围从1∶16到1∶256。从仔猪获得的母源抗体水平来看，虽然5日龄时无论细胞苗还是组织苗免疫的仔猪其抗体水平均在保护线之上，但细胞苗免疫仔猪抗体水平在1∶32以上占66.7%，而组织苗免疫仔猪能达到90%。由此可见，无论是母猪产生的主动免疫，还是仔猪获得的被动免疫水平，1头份组织苗的免疫效果均达到或超过4头份细胞苗的免疫效果。
2.2 两种疫苗免疫后仔猪母源抗体水平消长规律的比较：为进一步比较两种疫苗免疫后，仔猪获得的母源抗体的消长情祝，我们将三个猪场抗体不在保护线(1∶8)的结果进行统计，比较出每个年龄阶段不在保护线的百分比，结果见表2。由表2可以看出，以细胞苗免疫获得母源抗体的仔猪在10日龄时，其抗体水平就有13%不在保护线，至25日龄已有53%不在保护线，而由组织苗免疫获得母抗的仔猪在10日龄时，抗体水平均在保护线之上，至25日龄时仅有13%不在保护线，两者相比，经统计学分析，差异极其显著(P<0.05)。由此说明，由细胞苗免疫母猪后，仔猪获得的母源抗体水平下降速度快于由组织苗免疫母猪获得的母源抗体水平，也就是说由组织苗免疫获得的母源抗体水平维持时间较长。
2.3 细胞苗与组织苗免疫后猪场整体抗体水平的监测结果
2.3.1 细胞苗免疫的检测结果：98-99年间，我们对广西8个以细胞苗免疫猪场进行抗体监测，共抽查了4226头仔猪和629头母猪，由于数据较大，仅列表说明抗体水平不在保护线内的检测结果(见表3)（表3略，编者）。由表3看出，细胞苗免疫母猪后，仔猪所获得的母抗在14-16日龄至少有13%以上不在保护线，24-26日龄少则23%，多则40%不在保护线，而母猪在断奶后，有5-10%不在保护线。该检测结果与这些猪场时常发生零星散在的猪瘟是吻合的。
2.3.2 组织苗免疫的检测结果：2000-2002年间，上述猪场改用组织苗进行免疫，我们共抽查了1451头仔猪，318头母猪，结果见表4（表4略，编者）。由表4看出，组织苗免疫后14-16日龄阶段，最高只有13%不在保护线，低则只有2%不在保护线。24-26日龄阶段，高则只有16%不在保护线，低则只有10%不在保护线。猪场整体免疫效果明显优于细胞苗。
2.3.3 两种疫苗免疫抗体水平的比较：为了更直观看出细胞苗与组织苗之间差异，将两种疫苗的抗体水平检测结果汇总比较(见表5)。由表5看出，组织苗免疫后与细胞苗相比，14-16日龄阶段，只有6.7%不在保护线，而细胞苗有16.9%不在保护线。24-26日龄阶段，组织苗有13.3%不在保护线，而细胞苗却高达26.6%不在保护线。经统计学计算P<0.05，表明差异极其显著。
2.3.4 两种疫苗免疫猪场仔猪的成活率的统计结果：为了进一步观察两种苗的抗体水平与免疫保护的关系，本试验调查了从1998年至2002年几个猪场仔猪的成活率。结果见表6。从表中可见用细胞苗免疫其仔猪成活率为83-87%，而组织苗免疫的猪场仔猪成活率为91%-93%。仔猪的成活率提高了6-8个百分点。应该指出的是在1998-2000年间，这些猪场仔猪成活率较低，经调查发现这几个猪场在这些年间主要使用细胞苗，检测猪瘟抗体水平，普遍偏低。大多数死亡的仔猪解剖有猪瘟的病变，取样做RT-PCR检测，扩增出猪瘟病毒。由此推断，成活率低主要是猪瘟造成的。在2000-2002年改为组织苗后，猪瘟病例逐步减少。成活率明显上升。
3.1猪瘟免疫失败的原因很多，有认为流行毒株的基因已发生变异，向远离疫苗毒株的方向变化；也有认为是免疫程序不当等种种原因。但由本试验的结果和几年来对几个大猪场的抗体水平的监测及部分猪场的成活率的调查结果均表明，疫苗本身的问题也是我们必须考虑的因素之一。虽然细胞苗和组织苗都是由中国株猪瘟兔化弱毒种毒制造生产的，只是生产工艺不同。但是在生产实际及许多试验中，常常发现细胞苗仍有某些不如组织苗之处。究其原因除了病毒的毒价问题是应考虑的问题之外，组织苗中非特异性的兔疫作用也可能是造成组织苗免疫力比细胞苗强的原因之一。我们知道，细胞苗是由种毒接种犊牛睾丸细胞后收获而得，其本身仅有病毒的特异性免疫作用。而组织苗是用兔体组织制成，除具有病毒引起的特异性免疫外，这些组织中有许多是属于免疫器官，具有许多细胞因子，可起到非特异的免疫增强作用。我们曾进行了这样的试验，用1头份细胞苗与1头份组织苗作对比试验，结果细胞苗免疫效果明显不如组织苗，但若用正常的兔脾淋组织液稀释1头份细胞苗再与1头份组织苗做对比试验，结果两者免疫效果相当。由此看来，组织苗中非特异的免疫增强作用是值得进一步研究的。必须指出，细胞苗有许多优点，价廉、能长久保存、使用方便等。同时，在几年的调查中发现，一些条件较好，管理水平较高的猪场，多年使用细胞苗很难将疫情控制下来。因此，一个猪场应根据自己的实际情况来合理的选用疫苗。
3.2 将试验所得数据与调查所得数据比较时发现：同是细胞苗，试验的数据显示，在25日龄阶段有50%不在保护线；但抗体水平调查数据显示，在24-26日阶段只有26%不在保护线。之所以有这样的差异，其原因可能是做试验时，母猪仅在配种前免疫一次，产前的仔猪直至25日龄均没有免疫过，所测到的抗体主要是母源抗体。但抗体水平调查的数据并不是按这样严格进行的，有相当多的猪场已经在乳前和18—20日龄注射过疫苗，这样所测的抗体并不完全是母源抗体，而是主动免疫产生的抗体。因此，其抗体水平比试验组高就可以得到合理的解释。
3.3 在试验中，细胞苗免疫的母猪其抗体水平有的高达1∶ 256，组织苗最高只达1∶ 128。这似乎是细胞苗对母猪的免疫效果较好，其实不然，母猪的抗体水平过高并不是好事，按现有的细胞苗免疫效果不可能产生那么高的抗体水平，结合某些猪场高抗体水平的母猪同时伴有流产、死胎，因此推测这种抗体水平偏高的母猪可能是隐性带毒猪，应引起我们的高度警惕，当然，这还需进一步试验来验证。
3.4 由试验和调查结果来看，无论是抗体水平、抗体下降的速度或是仔猪的成活率，组织苗都明显优于细胞苗，在一些存在散发性猪瘟的猪场值得考虑使用组织苗以避免猪瘟的大流行。
猪瘟脾淋苗好还是细胞苗好？~
猪瘟疫苗目前主要有四种：脾淋苗（I）、乳兔苗（I）、细胞苗（II）和联苗。这四种疫苗的猪瘟毒株虽然均是中国系猪瘟兔化弱毒株（简称C株），但彼此间还是有一定的区别：（1）脾淋苗、乳兔苗和细胞苗为猪瘟单苗，单苗可以用于猪基础免疫. （2）普通苗一般指细胞苗（每头份不低于750RID的含毒量，远高于组织苗每头份不低于150RID的含毒量），既能防止临床发病，又能保护不发生亚临床感染，达到了“双保护”的水平，所以一般猪瘟免疫使用猪瘟细胞苗免疫就可以了。 （3）脾淋苗和乳兔苗，是兔源组织苗，是利用成兔和乳兔的活组织生产制备的，产量小，成本高，易污染。本类疫苗最好不用于乳前免疫，没吃初乳的子猪群免疫猪瘟活疫苗(兔源)可能诱发较严重的接种反应。 （4）在紧急免疫猪瘟苗时，组织苗优于细胞苗，可能因为组织苗中的一些组织蛋白，特别是淋脾苗中的淋巴因子是一种免疫促进剂。 建议 （1）子猪做基础免疫时最好选用猪瘟细胞苗，不要选用猪瘟组织苗（脾淋苗和乳兔苗）. （2）一旦发生猪瘟，须紧急免疫猪瘟疫苗时，建议使用猪瘟脾淋苗，必要情况下可以配合转移因子使用。 对于猪瘟免疫，某些养殖户说：“大剂量使用猪瘟疫苗，一头猪注射几十头份甚至上百头份，以毒攻毒，也未见产生明显的不良反应。”进而形成了“注射量多多益善”或“多了比少了好”的错误观点。 分析：无论是正常免疫猪瘟疫苗，还是紧急免疫猪瘟疫苗，大剂量使用猪瘟疫苗均是错误的做法，即使免疫后没有产生明显的不良反应，但后续的负效应是非常可怕的。 首先，猪瘟苗均是活疫苗，大剂量注射疫苗，无形中就给机体内注入了大量的病毒，就会给健康猪埋下“潜伏的病原”或加重病猪的疫情。 其次，大剂量使用猪瘟苗，不仅造成了疫苗的浪费，增加了成本，而且从长远来看，会影响猪瘟病毒的生态变化以及机体正常免疫能力的产生，甚至产生“免疫耐受”现象。 再其次，猪瘟活疫苗的生产过程，有时会发生被牛病毒性腹泻病毒（BVDV）污染的情况，这会使疫苗的免疫效能下降，甚至免疫失败（这是猪细胞苗存在的问题）。在这种情况下大剂量使用猪瘟疫苗，必然会增加疫苗对猪体的副作用。 建议 大剂量注射猪瘟疫苗，会造成猪体长时间带毒、排毒，猪场很难净化猪瘟，甚至猪场一旦发病，猪瘟都会起到主要作用。所以，对于猪瘟苗的使用，应当科学合理，按照实际情况定量免疫猪瘟疫苗。
组织培养的优点：
可以在不受植物体其它部分干扰下研究被培养部分的生长和分化的规律，并且可以利用各种培养条件影响它们的生长和分化，以解决理论上和生产上的问题。
有力地推动了生物科学中植物生理学、生物化学、遗传学、细胞学、形态学以及农、林、医、药等各门学科的发展和相互渗透，促进了营养生理、细胞生理和代谢、生物合成、基因转移、基因重组的研究。当前组织培养作为生物工程的一项重要技术，在基础理论研究和生产实践中发挥的作用与日俱增，可望为造福人类作出贡献。
组织培养缺点暂无，所以不做详细说明。
扩展资料组织培养应用：
一、无性系的快速繁殖：兰花、甘蔗和名贵品种的无性繁殖；
二、培育无病毒种苗：马铃薯、香蕉、苹果、甘蔗、葡萄、桉树、毛白杨、草莓、甜瓜、花卉；
三、新品种的选育
1、花培和单倍体育种；
2、离体胚培养和杂种植株获得；
3、体细胞诱变和突变体筛选；
4、细胞融合和杂种植株的获得；
参考资料：百度百科-组织培养
细胞苗组织苗
答：由表1可见以4头份细胞苗及1头份组织苗免疫的母猪,待仔猪断奶时,其抗体水平均在保护线之上(1∶16),其中以组织苗免疫产生的抗体水平较整齐,1∶64、1∶128各占70% (21/30)和26.7% (8/30),而细胞苗免疫产生的抗体水平不整齐,范围从1∶16到1∶256。从仔猪获得的母源抗体水平来看,虽然5日龄时无论细胞苗...
养猪场常用疫苗有哪些,猪养殖技术
答：猪瘟活疫苗：包括兔源(如脾淋苗和乳兔组织苗)和细胞源(如牛睾细胞苗)。2种疫苗免疫效果相当，如用于紧急预防用接种组织苗优于细胞苗，但组织苗不能用于乳前免疫，且疫苗价格较高。猪只在2l一30日龄和65日龄左右各免疫l次，母猪于配种前25d左右免疫l次，使用猪瘟细胞苗4头份或组织苗l一2头份...
猪的疫苗有哪些?
答：猪用疫苗的种类很多，按菌（毒）株性质可分为弱毒苗（也称活苗）和灭活苗（也称死苗）；按剂型可分为冻干苗、液体苗、干粉苗、油乳剂苗、组织苗等；按所含菌（毒）株的种类和血清型又可分为联合疫苗（联苗）和多价疫苗。联合疫苗是一个剂量的疫苗中包含几种病毒或细菌，如猪瘟、猪丹毒、猪肺疫...
猪瘟疫苗如何正确使用
答：(2)普通苗一般指细胞苗(每头份不低于750RID的含毒量，远高于组织苗每头份不低于150RID的含毒量)，既能防止临床发病，又能保护不发生亚临床感染，达到了双保护的水平，所以一般猪瘟免疫使用猪瘟细胞苗免疫就可以了。(3)脾淋苗和乳兔苗，是兔源组织苗，是利用成兔和乳兔的活组织生产制备的，产量...
猪瘟疫苗有哪些?如何区分使用?
答：⑨注苗的时间：最好是进食后2小时或进食前。⑩猪只发生免疫缺陷性疾病，如猪繁殖与呼吸综合征、圆环病毒感染等，康复后应补注猪瘟疫苗。?接种后剩余疫苗、空瓶、稀释和接种用具等应消毒处理。（2）猪瘟活疫苗（兔源）本疫苗即猪瘟活疫苗的组织苗。系用猪瘟兔化弱毒株病毒通过接种乳兔，收获感染兔的...
40斤的小猪打猪瘟用加量吗
答：2块钱一斤，，，我考，，，气死人
如何正确使用猪瘟疫苗?
答：简称C株），但彼此间还是有一定的区别。我们建议：_（1）仔猪做基础免疫时最好选用猪瘟细胞组织苗（脾淋苗和乳兔苗），禁止使用猪瘟三联苗或二联苗。猪瘟联苗常用于二免或断奶仔猪首免。_（2）一旦发生猪瘟，须紧急免疫猪瘟疫苗时，建议使用猪瘟脾淋苗，必要情况下可以配合转移因子使用。
预防鸭瘟、小鹅瘟的疫苗如何使用?
答：组织苗呈淡红色，细胞苗呈淡黄色，均为海绵状疏松团块，易与瓶壁脱离，加稀释液后迅速溶解。用于预防鸭瘟。注射后3～4天产生免疫力，2月龄以上鸭免疫期为9个月。对初生鸭也可应用，但免疫期为1个月。按瓶签注明的羽份，用生理盐水稀释，成鸭每只肌内注射1毫升，雏鸭腿部肌内注射0.25毫升。疫苗...
21天小猪做猪瘟育苗该打多少毫升?
答：21天小猪做猪瘟疫苗应该按几头份计算。组织苗还是细胞苗？一般情况下组织苗用2头份，细胞苗用1头份。
给猪打的猪瘟疫苗选用“细胞苗”还是“脾琳苗”好?
答：细胞苗好 我这里有好多猪场前些年用脾淋苗之后吃的亏 细胞苗价格合理 只要运输可靠就行了
