培养基的配制是怎么样的? 培养基的配制

作者&投稿:白霭 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

1.培养基种类及成分

培养基根据其物理性状大致分成两类,即固体和液体培养基。在培养基中加入一定量的凝固剂(如琼脂、明胶等)即为固体培养基,而不加入凝固剂的即为液体培养基,具体运用上应视培养目的要求不同分别选择采用。

无论是固体还是液体培养基,其基本成分是类似的,一般可大致分为两个部分,即基本培养基如MS、B5、N6、Nitsh等和附加成分,如激素和天然附加物等,其基本成分如表1、表2。

表1 几种培养基主要成分表

表2 几种培养基附加成分表

2.培养基的配制

(1)母液的配制与保存 由于培养不同植物,需要配制不同的培养基。为了减少工作量,可先把药品配成母液(即浓缩液),一般扩大10~100倍,其中大量元素倍数略低,一般为10~20倍,微量元素和有机成分及铁盐等可扩大50~100倍。母液的配制及保存应注意以下几个方面:①药品称量应精确,尤其微量元素化合物应精确至0.0001克,大量元素化合物可精确至0.01克。②配制母液的浓度适当,倍数不宜过大,一是长时间保存后易沉淀,二是浓度大,用量就少,在配制培养基时易影响精确度。③母液贮藏也不宜过长,一般几个月左右,在配好的母液容器上应注明配制日期,以便定期检查,如出现浑浊、沉淀及霉菌等现象,就不能使用。④母液应在2~4℃的冰箱内保存。

(2)培养基的配制 首先要根据培养基配方,算好母液吸取量,并按顺序吸取,然后加入蔗糖溶液,并加入蒸馏水定容至所需体积,并用0.1~1摩尔/升的盐酸或氢氧化钠调整pH,加入琼脂加热溶化,配制好的培养基要趁热分注,倒入试管、三角瓶等培养器皿中,一般至容器1/4~1/5左右,最后加塞或封口准备消毒。

(3)培养基的消毒 由于培养基内有丰富营养物质,极利于细菌和真菌繁殖,造成污染,影响组培的成功,因此培养基消毒是必不可少的一个环节。一般采用高温高压消毒和过滤消毒两种方法。

高温高压消毒:一般用消毒锅消毒,把装有培养基的培养器皿先放入消毒篓中,再放入加有水的消毒锅内,注意容器不能装得过满,以免影响锅内蒸汽循环。装好后将锅盖拧紧,加热,并打开放气阀,待水煮沸后,放气3~5分钟排出锅内冷空气,即可关上放气阀并继续加热,使锅内保持108千帕压力、温度120℃左右,大约15~20分钟即可。

过滤消毒:一些易受高温破坏的培养基成分如引哚乙酸(IAA)、引哚丁酸(IBA)、玉米素(ZT)等,不宜用高温高压法消毒,则可用过滤消毒后加入至高温高压消毒的培养基中,过滤消毒可用细菌过滤消毒器,通过其中的0.45微米孔径的滤膜将直径较大的细菌等滤去,过滤消毒应在无菌室或超净工作台上进行,以避免污染培养基。



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培养基的配制原理是什么啊!?~

按照微生物生长的营养需求及其相互比例配制的。
一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质,培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境,培养基种类很多。
根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基;根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基;根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等。

扩展资料:总体而言,所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。
自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖类、脂类、蛋白质、核酸、维生素等复杂的有机物,因此培养自养型微生物的培养基完全可以由简单的无机物组成。
例如,培养化能自养型的氧化硫硫杆菌,在该培养基配制过程中并未专门加入其他碳源物质,而是依靠空气中和溶于水中的CO2为氧化硫硫杆菌提供碳源。
参考资料:百度百科---培养基

培养基的配制:
1、称量和熬煮
按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
2、加热溶解
把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
3、分装
按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
4、加棉塞
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
5、包扎
加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
培养基配制注意事项:
1、培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。
2、PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
3、调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
4、培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。
5、培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.2g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性。

扩展资料
培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。
培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基。
根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基;根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等。
根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,通常有高温灭菌和过滤灭菌。
培养基由于富含营养物质,易被污染或变质。配好后不宜久置,最好现配现用。
参考资料:百度百科-培养基

高氏一号培养基的详细配制方法是什么啊
答:高氏一号培养基的配制步骤如下:1. 称量和溶化:按配方先称取可溶性淀粉,放入小烧杯中,并用少量冷水将淀粉调成糊状,再加入少于所需水量的沸水中,继续加热,使可溶性淀粉完全溶化。然后再称取其他各成分,并依次溶化,对微量成分FeSO4·7H2O可先配成高浓度的贮备液,按比例换算后再加入。待所有试剂...

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培养基要怎样配制?
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马丁培养基的配方及用途
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简述配制培养基应遵循的几个原则?
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怎样配制母液和培养基?
答:现在几乎各种花卉用的营养基配方都有,可以免去您再研究的麻烦,当然在生产实践中,也可适当改进。如果您找不到合适的配方,可先试用MS培养基,MS是Murashige和Skoog的缩写,他们二人于1962年研究出来了这种培养基。下面以MS培养基为例,介绍怎样配制。(1)配制母液。把培养基中的必需元素按原配方量的50...

简述配制培养基应遵循的几个原则?
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