北虫草母种的扩大培养如何操作？ 北虫草母种菌种怎样制作液体菌种？

由于母种数量一般较少，不能满足栽培需要。必须对其转管扩大。扩繁用的培养基可同综合马铃薯、葡萄糖琼脂（简称综合PDA培养基）。也可用以下配方培养基。比较简单的如：蔗糖10克、蛋白胨10克，硫酸镁0.5克，维生素B5片，琼脂15克，水1000毫升。或者用蔗糖30克，天门冬酰胺1克，硫酸铁0.3克，磷酸二氢钾1.25克，氯化钾0.5克，硫酸铁0.01克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。经高压灭菌后备用。

转管接种是培养真菌类药材的一个最基本的操作，需在无菌室或相对清洁的环境进行，有无菌室，可在接种前打开紫外光灯1小时，关闭后半小时可供使用。培养基及操作用具事先放入无菌室，母种可由接种者带入，进入接种室前先洗手，换上干净的，最好是经过灭菌的衣服、帽子，穿上无菌间专用鞋，进去后中途最好不要出来。无菌室的门不要再打开，全部工作完毕再开，避免外部杂菌进入。

接种用的接种针、镊子等可插入盛酒精的广口瓶中备用。工作人员用75%酒精棉球擦手及擦菌种试管外壁。点燃酒精灯，左手并排拿母种管及待接的斜面试管，斜面向上，便于观看，先用右手轻轻松动棉塞。再用右手拿接种针，在酒精灯上灼烧片刻，针尖要烧红，其他凡进入试管部分也都要烧一烧灭菌。然后用右手小指及小指与无名指间分别夹着两个棉塞，轻轻拨出，左手把两个试管口在火焰上烧一下。再把接种针在火焰上烧过，伸入待接种试管斜面上使它冷却，然后伸入原母种管内，勾出少许白色菌丝体（米粒大），放到待接种试管内，放在斜面的中心部位，以利其菌丝向周围生长延伸。然后将棉塞塞上。这样就完成了第一管的接种程序，接种动作要迅速，接第二管时接种针必须重新在火焰上烧过再用。接完后贴上标签，写上菌名，接种日期等，一般一支母种可转接20支以上甚至40支新斜面。可将其7～10支为一扎，用牛皮纸包好放入20～25℃进行培养，10～14天菌丝长满斜面，即成二级母种。可将它作为纯菌种保存。更可以用它来生产栽培种。

如何生产栽培北虫草种？~

栽培种分固体菌种和液体菌种两种。固体菌种的培养基以大米为主，配以营养液。营养液组成多种多样。较普通的为蔗糖2%，蛋白胨1%，磷酸二氢钾1%，硫酸镁0.5%，维生素B 0.02%。配制时大米与营养液按重量比1∶1.2的比例分装于三角瓶或罐头瓶中，每瓶大米30克，营养液36毫升。也可用大米25克，麦麸5克。或大米25克，蚕蛹粉5克。后两组的营养液应增加一些，按1.5的比例加入45毫升。
液体菌种培养基配方也较多，除了前边用于母种扩大的培养基（不加琼脂）外，还可用以下配方。
（1）葡萄糖2%，黄豆粉1%，磷酸二氢钾0.3%，硫酸镁0.04%，味精0.01%，食盐0.03%，维生素B 0.025%。
（2）葡萄糖3%，蛋白胨2%，磷酸二氢钾0.05%，食盐0.25%。
（3）葡萄糖2%，蛋白胨1%，酵母粉1%，磷酸二氢钾0.04%，硫酸镁0.04%，食盐0.05%，维生素B 0.02%。
以上培养基中，黄豆粉及酵母粉可按比例先称好分放三角瓶中。其他则按配方分别称量好，配成水溶液加入三角瓶。用容量500毫升三角瓶，每瓶可放培养液150～200毫升。常规塞上棉塞，包上牛皮纸。用线绳扎好即可。
固体或液体培养基做好后，都必须进行消毒灭菌。高压灭菌（147千帕30至40分钟），常压则要4小时。灭菌后要等温度自然下降到25℃，才能准备接种。一支二级母种可接6至8瓶固体培养基，接种时在酒精灯旁操作。一个人或两个人配合进行均可。主要动作要快，尽量减少菌种在容器外移动的时间，试管及瓶子开口的时间，以杜绝杂菌污染机会。一支母种可以接6～10瓶液体用。接种后固体培养放在20℃以下条件发菌，2～3天就萌发新菌丝。由于固体栽培种主要是为获取大量菌丝，菌丝生长不需要光，所以除检查生长情况瓶子见光外，瓶子应避光，可用黑布罩起培养架。一般10～14天菌丝可长满大米培养基。待用。液体种子除在黑暗条件下培养外，还需要一定的设备，较普遍用的是摇床，也叫摇瓶机，是液体菌种进行震荡培养的设备。分往复式和旋转式两种。前者的摇荡频率是每分钟80～120次。结构比较简单，由电动机、连杆、减速皮带、偏心轮和装有滚动活轮的搁盘组成，搁盘可放两排三角瓶。可自行设计制造。安装在有控温仪的培养室应用。后者可向有关仪器厂购进，其摇荡频率是可调的。培养北虫草用150～200转/分就可。液体菌种在摇床上生长比较快，5～7天液体中会形成大量均匀的由菌丝体组成的小球。则可作为栽培种。值得注意的是，如果培养液变混，有两种可能性，一是菌丝生长过于粘稠，但静置时菌液上表面边缘较透亮，菌液也无异常气味这属正常，否则可能是细菌污染，往往有异味，则应予以淘汰。

2、配制方法：大米或小麦按每袋50克或100克分装入塑料袋。将1.5升50℃的热水倒入干净盆内，将虫草专用防污剂放入热水中，搅至完全溶解即成营养液。按料水比（即大米或小麦与营养液的用量比）1克：1.5毫升称取营养液倒入装好大米的塑料袋内。分装完后用塑料绳将每个塑料袋中部和口部各扎一道。
　　3、灭菌：灭菌锅内加适量水，把培养料袋放入灭菌锅，升温至100℃，保持1小时。取出，冷却后移入接种室。用优质气雾消毒剂或常规方法密闭消毒30分钟，即可穿戴消毒衣服进入接种室接种。
　　4、接种：进入接种室应迅速关好门（防止含有杂菌的空气进入）。接种工具、菌种外壁、操作人员双手等，用75%酒精擦拭或浸沾消毒。现介绍易推广的用固体大米菌种接种的方法：
　　①试管原种的转扩栽培：拔去试管塞后用消毒的接种钩挖取豆粒大小的菌种2-3块，接入培养基面上，稍扎紧袋口即可。
　　②用原种转扩栽培袋时，先将菌种捣成指头或豆粒大小块状，每袋接入5-10克菌种，均匀分布在料面上。如条件允许可适当增加接种量，以利菌丝较快生长。接种完后按原扎口方法稍扎紧袋口，即可移入经杀菌和防虫处理的培养室内培养。
　　③采用液体菌种接种方式的，在无菌条件下，打开封口材料，用接种枪将液体种喷匀即可。接种量视容器大小而定，也有在液体菌种中加入一定比例的无菌水再接种的。

蛹虫草虫体栽培操作有哪些要点?
答：培养条件：一级摇瓶菌种一般利用500ml的锥形瓶，培养基装量100～150ml，一支斜面菌种可接4～5瓶，振荡频率150次/min，于22～25℃培养96h。二级摇瓶用1000ml的锥形瓶，装液量150～300ml，接种量10%，90次/min，振荡培养72～96h。当菌液为深棕色，有很浓郁的虫草味时就可感染虫体，根据菌液浓度（...

虫草花养殖栽培方法
答：4.接种：进入接种室应迅速关好门(防止含有杂菌的空气进入)。接种工具、菌种外壁、操作人员双手等，用75%酒精擦拭或浸沾消毒。5.培养：北虫草属中低温菌类，菌丝生长温度范围为5～30℃，菌丝最适生长温度为15～25℃，子座最适生长温度为18～22℃。最初将温度保持15～18℃遮光培养。当菌丝生长至培养...

虫草种植技术 详细点 谢谢了
答：一、主要原材料 1．虫草菌种：可向专业科研单位或生产厂家购买蛹虫草母、原种直接使用，也可经试验后再用于生产。2．活蚕：应选3～4龄生长健壮，长度和粗度较均匀的活蚕。可向蚕场、桑蚕养殖户购买，也可购蚕种自己繁殖。3．虫草专用防污剂：是一种制种栽培用防污添加剂，主要用于培养基中，以增强...

【食虫草种植方法】食虫草的种植方法介绍
答：5、播种方式：因食虫草种子细小，不便操作，最好将种子固定在吸水纸上，一个红圈内一粒种子，播种前将种子连同吸水纸一起剪下，用尖嘴钳夹住吸水纸，摆放在基质表面。播种量以每穴1—2粒为宜。6、覆盖：食虫草的种子具有好光性，需要适当的光照才能更好的萌发，所以播种后可不用覆盖。7、喷雾保湿：...

蛹虫草人工培育技术
答：人工培育蛹虫草时，先将蛹虫草菌接种于培养基上，形成大量的分生孢子，再挑取分生孢子用无菌水制成孢子悬浊液，接种于宿主即蛹体上，保护蛹体直至僵硬。然后将僵硬的蛹体放在模拟蛹虫草自然生态条件下培养，从蚕蛹中长出的子座便同野生蚕蛹长的一模一样。 具体操作如下： 1、菌株的筛选 将蛹虫...

简述冬虫夏草的养殖技术及产品加工技术?
答：如果是第二年5一6月份采的材料,僵虫体和子座上都有许多种杂菌共生或腐生,难获得纯菌种。若用子囊孢子进行分离培养,材料最好在每年的7月中、下旬子囊孢子刚有部分成熟期采集分离培养。 (2)操作方法。有以下3步。 a.僵虫体 (即菌核)的分离:分离前,用水刷洗干净主体表面,再用无菌水清洗2一3次;用0.1%一...

北虫草母种菌种怎样制作液体菌种
答：3、灭菌：灭菌锅内加适量水，把培养料袋放入灭菌锅，升温至100℃，保持1小时。取出，冷却后移入接种室。用优质气雾消毒剂或常规方法密闭消毒30分钟，即可穿戴消毒衣服进入接种室接种。4、接种：进入接种室应迅速关好门（防止含有杂菌的空气进入）。接种工具、菌种外壁、操作人员双手等，用75%酒精擦拭或...

北虫草的液体菌种一般培养几天 到什么程度就可以喷大米了 液体菌种培 ...
答：1000ml摇瓶为例，装液量500-600ml，北虫草摇瓶接种后静止培养48小时，摇48小时就满了，如果48小时以内不满，说明试管有问题。发酵罐培养接种后48-72小时满罐，标准：放出一点菌种到干净的空试管中，菌种占试管的80%。垂直放置2小时后，菌种不沉淀不上浮，始终保持悬浮状态，说明菌种成功就可以使用了...

蛹虫草生活型和适应型
答：待蛹虫草菌丝布满斜面后再提纯。获得的孢子母种须经出草比较试验后，选取优质虫草子实体再进行一次组织分离，经筛选后方可用于转扩栽培种。考种 将母种扩大培养后，置米饭培养基上，于18℃-20℃下培养20-30d，观察生长情况。若见有细菌或霉菌污染，应对母种进一步纯化；若无杂菌污染，可继续培养，一个...

冬虫夏草的菌种怎么培育
答：3.培养方式 冬虫夏草菌分离纯化后,即可作为各种实验和扩大生产应用。(1)其扩大生产的方法常有三种:固体静置培养法、振荡培养法和大罐通气发酵培养法。a.静置培养:主要用在固体培养,如试管斜面、三角瓶培养、米饭培养等等。在静置培养中只要掌握好温度和光照即可使菌正常生长。当斜面上的分生孢子成熟后,即可存入1一...