原位发酵罐培养微生物时，如何做到纯培养，灭菌措施有哪些，如何操作
发酵罐如何灭菌彻底~
发酵罐的结构比较复杂，对于内部的边边角角不容易消毒，一般的发酵罐有自动清洗装置，清洗完之后彻底灭菌
1.
在培养基灭菌之前，通常应先将与罐相连的分空气过滤器用蒸汽灭菌并用空气吹干。实罐灭菌时，先将输料管路内的污水放掉冲净，然后将配制好的培养基泵送至发酵罐（种子罐或料罐）内，同时开动搅拌器进行灭菌。灭菌前先将各排气阀打开，将蒸汽引入夹套或蛇管进行预热，待罐温升至80~90℃，将排气阀逐渐关小。接着将蒸汽从进气口、排料口、取样口直接通入罐中（如有冲视罐也同时进汽），使罐温上升到118~120℃，罐压维持在0.09~0.1Mpa（表压），并保持30min左右。各路进气要畅通，防止短路逆流，罐内液体翻动要激烈；各路排汽也要畅通，但排汽量不宜过大，以节约用气量。在保温阶段，凡进口在培养基液面以下的各管道及冲视镜管都应进汽；凡开口在液面之上者均应排汽。无论与罐连通的管路如何配制，在实消时均应遵循“不进则出”的原则。这样才能保证灭菌彻底，不留死角。保温结束后，依次关闭各排汽、进汽阀门，待罐内压力低于空气压力后，向罐内通入无菌空气，在夹套或蛇管中通冷却水降温，使培养基的温度降到所需的温度，进行下一步的发酵和培养。在引入无菌空气前，应注意罐压必须低于过滤器压力，否则物料将倒流入过滤器内，后果严重！灭菌时，总蒸汽管道压力要求不低于0.3~0.35Mpa，使用压力不低于0.2Mpa。
2.
空罐灭菌（空消）即发酵罐罐体的灭菌。空消时一般维持罐压0.15~0.2Mpa，罐温125~130℃，保持30~45min；要求总蒸汽压力不低于0.3~0.35Mpa，使用汽压不低于0.25~0.3MPa。
蒸汽原位灭菌的流程：
灭菌要进行空消和实消两步。空消是在投料前，对气路、料路、种子罐、发酵罐用蒸汽进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态。实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程，种子罐和发酵罐实消的操作过程相同。
空消过程中，维持蒸汽温度121℃左右，先开排污水阀和进气阀，排空夹套水，在对管路、滤器和种子罐发酵罐灭菌，空消时间大约为30到40分钟，当设备初次使用或者长期不用的情况下，最好采用间歇灭菌的方法，间歇灭菌指第一次空消结束后，间隔3到5个小时再空消一次，以便杀死芽孢。除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压，因此，蒸汽减压阀必须调整在0.13Mpa，不得超过0.15MPa。空消时，应将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为0.13～0.15Mpa。空消结束后，应将罐内冷凝水排掉，并将排空阀门打开，防止冷却后罐内产生负压、损坏设备。空消时，溶氧、PH 电极取出，可以延长其使用寿命。
空消结束后，应尽快将配好的培养基从加料口加入罐内，此时夹套内应无冷却水。培养基在进罐之前，应先糊化，一般培养基的配方量以罐体全容积的70%左右计算(泡沫多的培养基为65% 左右，泡沫少的培养基可达75%～80%)，考虑到冷凝水和接种量因素，加水量为罐体全容积的50% 左右，加水量的多少与培养基温度和蒸汽压力等因素有关，需在实践中摸索。先开启机械搅拌装置，使罐内物料均匀混合，转速50～100rpm。打开夹套蒸汽阀、排汽阀，对罐内培养基预热，当罐内温度升到90℃时，关闭夹套进汽阀，打开罐内所有进汽阀，通入蒸汽。当罐温上升到105℃时，缓缓打开排汽阀，将罐顶冷空气排掉，持续五分钟后，关闭排汽阀。当罐压升至0.12Mpa，温度升到121～123℃时，控制蒸汽阀门开度，保持罐压不变，30 分钟后停止供汽。打开冷却水的进排阀门，在夹套内通水冷却，当罐内压力降至0.05Mpa 时，微微开启排气阀和进气阀，进行通气搅拌，加速冷却速度，并保持罐压为0.05Mpa，直到罐温降至接种温度。
好氧微生物液体培养主要有哪些形式?它们各自有哪些用途和特点?_百度...
答：在生产中常用：1)浅盘培养(shallow pan culture)容器中盛装浅层液体静止培养，没有通气搅拌设备，全靠液体表面与空气接触进行氧气交换。这是最为原始的液体培养形式。2)发酵罐深层培养液体深层培养的主体设备是发酵罐。发酵罐可以为微生物提供丰富而均匀的营养，良好的通气搅拌，适宜的温度和酸碱度，并能...
微生物发酵工程工作流程?
答：从化学工程的角度来看，发酵罐也就是生产原料发酵的反应器，发酵罐中培养的微生物细胞只是一种催化剂，按化学工程的正统思维，微生物当然难以发挥其生命特有的生产潜力。于是，追溯到作坊式的发酵生产技术的生物学内核（微生物），返璞归真而对发酵工程的属性有了新的认识。发酵工程的生物学属性的认定，使...
微生物发酵杂菌污染的途径 控制方法
答：内部消毒灭菌要严格按照要求进行，在保证室内微生物数量情况下，空气过滤系统就是关键了。如果是车间大生产，首先是保证种子无污染。因为通常发酵罐工作时是正压状态，主要仍是空气过滤系统，特别是过滤器和空气杀菌消毒装置，采风口最好是高空，一定要保证过滤和杀菌效率。其次是发酵罐和管道消毒，特别是要...
工业微生物发酵根据投料方式不同分为哪几种
答：【答案】：工业微生物发酵根据投料方式不同分为：①分批发酵。把菌体和培养液一次性装入发酵罐。②补料分批发酵。在分批发酵过程中连续不断的补充新培养基，但并不连续的向外放出发酵液。③连续发酵。以一定的速度向发酵罐中添加新鲜培养基，并以相同速度流出发酵液，使发酵罐的液量状态近似恒定。
在培养需氧型微生物时怎样导入氧气?
答：摇床三角瓶培养，发酵罐则通风搅拌处理，固态发酵则疏松物料处理加疏松填充料，或定期搅拌，以及吹入无菌空气。无菌空气发生器很多，需要过滤加压等处理。
发酵方式有哪些?
答：然而，连续培养也有缺点：- 长时间连续培养难以保证纯种培养。- 菌种发生变异的可能性较大。因此，在工业规模上很少采用。生产中，只有丙酮丁醇厌氧发酵、纸浆液生产饲料酵母以及活性污泥处理各种废水等特定情况下才会使用连续培养工艺，通常这种方法更多用于实验室研究微生物的生理特性。建议深入研究发酵过程控制...
好痒微生物体液培养主要有哪些形式
答：从而使发酵罐内的液量维持恒定,使微生物在稳定状态下生长.生产上常用的就是这类连续发酵系统,如在制药厂中生产抗生素的发酵大罐等.（3）补料分批发酵,又称半连续发酵,是介于分批发酵和连续发酵之间的一种发酵技术.指在微生物分批发酵中,以某种方式向培养系统补加一定物料的培养技术.
微生物发酵时,如果采用连续培养,流出的培养液中应该有菌体吧?_百度知...
答：有；连续式培养是将细胞接种于一定体积的培养基后，为了防止衰退期的出现，在细胞达最大密度之前，以一定速度向生物反应器连续添加新鲜培养基，同时，含有细胞的培养物以相同的速度连续从反应器流出，以保持培养体积的恒定。灌流式培养是细胞和培养基一起加入反应器后，在细胞增长和产物形成过程中，不断地...
微生物发酵的三种主要方式
答：3、发酵过程是通过生物体的自动调节方式来完成的，反应的专一性强，因而可以得到较为单一的代谢产物。二、发酵的过程：1、菌种以及确定的种子培养基和发酵培养基的组成；2、培养基、发酵罐和辅助设备的灭菌；3、大规模的有活性、纯种的种子培养物的生产；4、发酵罐中微生物最优的生长条件下产物的大规模...
生物发酵罐尾气加热有什么作用
答：尾气加热就是利用尾气的热量给其他工作介质加热。发酵罐是用于将乳制品和酒类进行发酵处理的一种罐子，也是用于培养微生物或细胞的封闭容器或生物反应装置。发酵罐采用了无菌系统，防止产品被空气中微生物的污染，保证产品的保质期和味道的纯正。可通入加热或冷却介质来进行循环加热或冷却。生物发酵罐设备的...
