仪器分析知识点〔超详解〕（二）紫外分光光度法
紫外分光光度法的深度解析
紫外分光光度法中，吸收带的类型揭示了化合物结构与光谱特征的深刻联系。以下六个关键类型揭示了化合物在紫外-可见光谱中的独特表现：
R带
由含杂原子的不饱和基团，如C＝O、C＝N、—N＝N— 或—NO2产生的电子跃迁，R带特征显著。其吸收峰在250-500nm，εmax较低，小于100。测定n→π*跃迁时，选择浓溶液可观察到λmax下降和蓝移，这有助于判断该类型的跃迁存在。R带有时会因邻近强吸收峰而长移，或被掩盖。
K带
源自共轭体系的π-π*跃迁，K带是紫外吸收中极为重要的带，如共轭双烯、α,β-不饱和醛酮、芳香族醛酮和某些被发色团取代的苯。其λmax通常大于200nm，εmax高达10,000。随着共轭链的增长，λmax会红移。K带在判断共轭体系的存在上具有关键作用，且溶剂极性增加时，λmax会进一步红移。
B带和E带
这两种带均起源于苯环的π-π*跃迁，B带在蒸气状态下具有精细结构，而在极性溶液中表现为宽峰，εmax在200-3000之间。E带，特别是E1带，强度明显，λmax一般在180nm左右。苯环的取代基对E2带有影响，红移现象常见，但通常不超过210nm。当有发色团和共轭存在，E2带可能转变成K带。
分子结构与UV-Vis吸收光谱的关系
有机化合物的紫外吸收特性，受电子跃迁类型及其结构影响。例如，饱和化合物在远紫外区有s®s*跃迁，而不饱和化合物如C=O和C=N则可能涉及n®s*和n®p*跃迁。共轭烯烃的π-π*跃迁形成K带，其吸收带位置受到溶剂、位阻和跨环效应的影响。
光吸收定律的精要
光吸收定律描述了物质对单色光吸收程度与浓度和液层厚度的密切关系。Lambert-Beer定律是分光光度法的基石，它指出，吸光度与物质浓度和厚度成正比，但只有在特定条件下——稀溶液、单色光和平行光照射——该定律才成立。吸光度的加和性使得多组分混合测定成为可能。
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