回答下列有关生物工程的问题.如图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的 图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别

作者&投稿:支眨 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
(1)若要构建重组质粒,一般要用同一种限制酶进行切割,形成相同的黏性末端,然后再用DNA连接酶连接.因此在目的基因和质粒上必须存在同一种限制酶的切割位点,需要对目的基因进行测序,以确定选用何种酶.限制酶的作用的部位是磷酸二酯键.
(2)若用EcoRI酶对目的基因和质粒进行酶切,再用DNA连接酶处理,则由两个DNA片段连接形成的产物有3种:重组质粒、目的基因与目的基因连接物、载体和载体连接物.由于EcoRI酶的识别位点刚好在四环素抗性基因上,因此重组质粒中,该抗性基因已经被破坏,而目的基因与目的基因连接物上没有该基因,只有载体和载体连接物上把两个切割后的四环素抗性基因进行拼接形成两个完整的四环素抗性基因.
(3)为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用EcoRI和BamHI两种酶同时切割目的基因和质粒.由于这两种酶能切割形成不同的黏性末端,使得目的基因与目的基因、载体和载体之间无法连接,而目的基因和质粒却能够连接.
(4)核糖体由蛋白质和rRNA构成,可以利用酶的专一性用蛋白酶将蛋白质水解,从而提纯rRNA,A正确;无水乙醇可以溶解所有光合色素,没有利用生物分子间的特异性结合,B错误;分子杂交手段是利用了碱基互补配对的原则,C正确;抑制成熟基因的mRNA与催化成熟酶基因的mRNA之间发生了碱基互补配对,也利用了分子间特异性结合,D正确.
(5)从变异的角度看,基因工程的原理是基因重组;而植物细胞杂交的原理是染色体变异.
故答案为:
(1)限制性DNA内切酶      磷酸二酯键
(2)3     载体和载体连接物
(3)EcoRI、BamHI
(4)ACD
(5)基因重组   染色体变异

如图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基~

(1)由于含有目的基因的DNA片段和质粒上均含有EcoRI酶的切割位点,所以用此酶切割后产生相同的黏性末端.这样,具有相同黏性末端的片段用DNA连接酶均可连接,从而产生3种连接产物,目的基因-载体连接物、载体-载体连接物、目的基因-目的基因连接物,所以要进行分离纯化.(2)由于将细胞放入含四环素的培养基,要将存活tctR 为四环素抗性基因结构要保持完整,用EcoRI酶切后再用连接酶连接的三种产物只有载体-载体连接物基因结构保持完整.(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是启动子,其合成的产物是RNA,此过程称为转录,原料是核糖核苷酸.(4)防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,需要有两种限制酶,而ampR为青霉素抗性基因,P启动子,T为终止子,ori为复制原点,结构不能被破坏,故选择EcoRⅠ和BamHⅠ这两种限制酶.故答案为:(1)目的基因-载体连接物 载体-载体连接物 目的基因-目的基因连接物 分离纯化 (2)载体-载体连接物 (3)启动子 RNA 转录 核糖核苷酸(4)EcoRⅠ和BamHⅠ

如图中箭头所指,如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会有这样一些可能:a b c d b+c+d a+b c+d a+b+c d b+c 故选

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