怎么在最后一步设置 使其显示溶解曲线(荧光定量PCR,没有溶解曲线,我们是7500fast机器,软件是1.4谢谢 请问:实时荧光定量PCR怎样设定才能有溶解曲线?

作者&投稿:点芬 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
我用的是BIO-RAD的iQ5,设置溶解曲线的时候是在反应程序设置那里多设置一步,并且在采光那里再设置一下,就好了

我用的是ABI的7500,你跑完之后 新建一个程序文件,然后在Assay里面选择Dissociation 再跑一次就行了。

你是哪的,可以打8008304008电话问达安公司,他们各省都有技术人员。

怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线~

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用Syber Green方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和Syber Green分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和Syber Green结合。
一般每加温一度,读一次信号。当温度到达PCR产物的Tm时,产物解离一下增多。曲线的横坐标是温度,而纵坐标是荧光信号的变化,开始加热,信号变化不大,所以几乎是平的。
接近Tm时,突然变化加大,所以出现峰值。再升温,产物全部解离,就又是一条直线了。如果有非特异性产物,在加热过程中就会出现一些比较矮,宽的峰。

扩展资料:
荧光定量pcr通过荧光信号不断累积而实现实时监测PCR全程,然后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在实时荧光定量PCR中,对全程PCR扩增过程进行实时检测。
根据反应时间和荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号,荧光域值的缺省设置是3~15个循环的荧光信号标准偏差的10倍。
熔解曲线分析可以用来确定不同的反应产物,包括非特异性产物。熔解温度上有一特征峰(Tm,DNA双链解链50%的温度),用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开,因为它们在不同的温度熔解线,随着反应中双链DNA变性。
参考资料来源:百度百科-荧光定量PCR
参考资料来源:百度百科-溶解曲线

在设置反应程序时,在最后加一步