我想要大肠杆菌液体培养所需要的培养基和制作过程 越详细越好 谢谢 如何制作大肠杆菌的培养基??

作者&投稿:韦韵 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
GYT培养基(Tung and Chow 1995)
10%(v/v)甘油
0.125%(m/v)酵母提取物
0.25%(m/v)胰化蛋白胨
使用0.22um滤器过滤除菌,分装成2.5ml一份,保存于4℃。
LB(Luria-Bertani)培养基
配制每升培养基,应在950ml去离子水中加入:
胰化蛋白胨 10g
酵母提取物 5g
NaCl 10 g
摇动容器直至溶质溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
M9培养基
配制1L培养基,应在750m1无菌去离子水(冷至50℃或50℃以下)中加入:
5×M9盐溶液 200ml
1 mol/LMgSO4 2 ml
适当碳源的20%溶液(如20%葡萄糖) 20ml
1 mol/LCaCl2 0.1 ml
灭菌的去离子水至980ml。
如果需要,可在M9培养基中补加适当氨基酸和维生素的贮存液。
5×M9盐溶液配制:用无离子水溶解下列盐类,终体积为1L:
Na2HPO4·7H2O 64g
KHPO4 15g
NaCl 2.5g
NH4Cl 5.0g
分装成200ml一份,在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌15min。
分别配制MgSO4溶液和CaCl2溶液,高压灭菌。用无菌水将5×M9盐溶液稀释至980ml后,加入MgSO4和CaCl2溶液。葡萄糖溶液在加到稀释的M9盐溶液之前,用0.22um滤器过滤除菌。当使用含有染色体上脯氨酸生物合成操纵子缺陷[△(lac-proAB)]的大肠杆菌以及互补的proAB基因在F'质粒上时,在M9基本培养基中补加下列成分:
0.4%(m/v)葡萄糖(右旋糖)
5mM MgSO4·7H2O
0.01%硫胺
NZCYM培养基
配制每升培养基,在950ml去离子水中加入:
NZ胺 10g
NaCl 5g
酵母提取物 5g
酪蛋白水解物 1g
MgSO4·7H2O 2g
摇动容器直至溶质完全溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。
在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
NZ胺:酪蛋白酶促水解物(ICN Biochemicals公司)。
NZCYM、NZYM和NZM也可用BD Biscienses公司的脱水培养基。
NZYM培养基
NZYM培养基除不含酪蛋白水解物外,其他成分与NZCYM培养基相同。
NZM培养基
NZM培养基除不含酵母提取物外,其他成分与NZYM培养基相同。
SOB培养基
配制每升培养基,在950ml去离子水中加入:
胰化蛋白胨 20g
酵母提取物 5g
NaCl 0.5 g
摇动容器使溶质完全溶解。加10ml 250mmol/L KCl溶液(将1.86g KCl用100ml去离子水溶解即配成250mmol/l KCl溶液)。用5mol/L NaOH<!>调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15 psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。该溶液在使用前,加入5ml灭菌的2 mol/l MgCl2[2mol/L MgCl2溶液的配制方法如下:用90ml去离子水溶解19g MgCl2,用去离子水调整体积为100ml,在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min]。
SOC培养基
SOC培养基除含有20mmol/L葡萄糖外,其他成分与SOB培养基相同。SOB培养基经高压灭菌后冷至60℃或60℃以下,加20ml除菌的1mol/L葡萄糖溶液(1mol/l葡萄糖溶液的配制方法是:用90ml去离子水溶解18g葡萄糖,完全溶解后,用去离子水定容至100ml,用0.22um滤器过滤除菌)。
Terrific肉汤(又称TB培养基,Tartof and Hobbs 1987)
配制每升培养基,在900ml去离子水中加入:
胰化蛋白胨 12g
酵母提取物 24g
甘油 4ml
摇动容器使溶质完全溶解。然后在15psi(1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。当溶液冷至60℃或60℃以下时加入100ml无菌的0.17mol/L KH2PO4,0.72mol/L K2HPO4溶液[该溶液的配制方法是:用90ml去离子水溶解2.31g KH2PO4和12.54g K2HPO4,完全溶解后,用去离子水定容至100ml并在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
2×YT培养基
配制每升培养基,在900ml去离子水中加入:
胰化蛋白胨 16g
酵母提取物 10g
NaCl 5g
摇动容器直至溶质溶解,用5N NaOH调pH值至7.0,用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。

大肠杆菌培养基的制备-新冠病毒疫情期间专用



大肠杆菌培养基配制及培养方法~

大肠杆菌培养基的制备-新冠病毒疫情期间专用

大肠杆菌培养基的制备-新冠病毒疫情期间专用

养大肠杆菌的具体步骤
答:1、发酵法,这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养,该培养基含有荧光底物,需要培养 24 h。然后对荧光底物进行释放,需要采用葡萄糖醛酸进行,让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等。2、滤膜法主要过程:加入 10 mL 左右的无菌...

大肠杆菌扩大培养
答:在含3ml LB液体培养基的20ml试管中加入30ul甘油菌种,37度,180转/分,过夜.次日,将此得到的菌液全部加入含300ml LB液体培养基的三角烧瓶中,200转/分 ,摇3个小时.

基本培养基需要保证大肠杆菌所需的
答:基本培养基需要保证大肠杆菌所需的(基本营养需求)。基本培养基是仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基。其配方仅为蒸馏水、葡萄糖 0.5%、硝酸铵 1.0 g/L、磷酸二氢钾 0.5g/L、磷酸氢二钠 1.5g/L、氯化钠 1.0g/L、七水硫酸镁 0.2g/L ,PH一般为 7.2。该培养基只能满足大肠杆菌...

为什么大肠杆菌的培养基至少要加入葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、NH4NO3和水...
答:因为这是它生存的需要的基本营养物质

培养细菌菌落需要什么条件?
答:培养细菌菌落需要一定的条件,主要包括以下几个方面:培养基:不同种类的细菌需要不同的培养基,一般包括碳源、氮源、矿物质和生长因子等。常用的培养基有营养琼脂、大肠杆菌培养基、LB培养基等。温度:不同种类的细菌对于生长的温度要求不同,一般在20-45℃之间。例如,大肠杆菌的最适生长温度为37℃。pH...

植物组织培养、动物细胞培养、大肠杆菌的培养,分别在培养基中加入什么营...
答:②动物细胞培养液的特点:液体培养基、含动物血清。 ③动物细胞培养的条件:无菌、无毒的环境;营养物质(合成培养基);温度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4);气体环境(氧气和二氧化碳)等。 一般大肠杆菌都使用LB 培养基,其成分如下: 胰化蛋白胨、 酵母提取物、 NaCl 、如果是固体的培...

细菌培养每个培养皿倒多少毫升培养基
答:15*4.5*4.5*0.2(或0.3)=12.7ml(或19.1ml),因此需要15ml左右,具体厚度需要根据实验要求酌情增加培养基的倒入量。倒平板的时候不宜过厚,过厚移菌不好移,容易粘在打孔器上,而其移到下一个培养基上培养条件不同,原培养基太多的话,不利菌适应新的环境,过薄则不利于微生物生长。

筛选大肠杆菌的培养基是什么培养基
答:应该是选择培养基。选择培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。

如何制备大肠杆菌感受态细胞
答:大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 准备:一.材料 E.coli DH5α菌株:Rˉ,Mˉ,Ampˉ;pBS质粒DNA:购买或实验室自制,eppendorf管.二.设备 恒温摇床,电热恒温培养箱,台式高速离心机,无菌工作台,低温冰箱,恒温水浴锅,制冰机,分光光度计,微量移液枪.三.试剂 1.LB固体和液体培养基 2.Amp母液 3.含Amp的...

LB培养基配方,谢谢。
答:氯化钠(NaCl) 10g/L;另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4,LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求,可分为液体培养基和固体培养基。LB培养基则 近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。两者都属于半...