枯草芽孢杆菌培养基的配制方法? 有没有枯草芽孢杆菌的组合培养基配方?

作者&投稿:禾贩 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
枯草芽孢杆菌常用培养基配方:

1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂

枯草芽孢杆菌原生质体的制备

1 培养枯草芽孢杆菌
取亲本菌株T4412、TT2 新鲜斜面分别接一环到装有液体完全培养基(CM)的试管中,36℃振荡培养14 h,各取1 mL 菌液转接入装有20 mL 液体完全培养基的250 mL 锥形瓶中,36℃振荡培养 3 h,使细胞生长进入对数前期,各加入25 u/mL 青霉素,使其终浓度为0.3 u/mL,继续振荡培养2 h。

2. 收集细胞
各取菌液10 mL,4000 r/min 离心10 min,弃上清液,将菌体悬浮于磷酸缓冲液中,离心。如此洗涤两次,将菌体悬浮10 mL SMM 中,每mL 约含108~109 活菌为宜。

3. 总菌数测定
各取菌液0.5 mL,用生理盐水稀释,取10-5、10-6、10-7 各1mL(每稀释度作两个平板)、倾注完全培养基,36℃培养24 h 后计数。此为未经酶处理的总菌数。

4. 脱壁
二株亲本菌株各取5 mL 菌悬液,加入5 mL 溶菌酶溶液,溶菌酶浓度为100 ug/mL,混匀后于36℃水浴保温处理30 min,定时取样,镜检观察原生质体形成情况,当95%以上细胞变成球状原生质体时,用4000 r/min 离心10 min,弃上清液,用高渗缓冲液洗涤除酶,然后将原生质体悬浮于5 mL 高渗缓冲液中。立即进行剩余菌数的测定。

5. 剩余菌数测定
取0.5 mL 上述原生质体悬液,用无菌水稀释,使原生质体裂解死亡,取10-2、10-3、10-4 稀释液各0.1 mL,涂布于完全培养基平板上,36℃培养24~48 h,生长出的菌落应是未被酶裂解的剩余细胞。
计算酶处理后剩余细胞数,并分别计算二亲株的原生质体形成率。原生质体形成率=未经酶处理的总菌数一酶处理后剩余细胞数。

蛋白胨 10g/L
酵母粉 5g/L
氯化钠 10g/L

配制固体培养基视琼脂粉的效果加 6g~16g

生物实验:蛋白胨20g牛肉膏15g酵母膏15g琼脂7g 溶解 灭菌 做斜面 接种

、枯草芽孢杆菌的富集培养基怎么配制~

生物实验:蛋白胨20g牛肉膏15g酵母膏15g琼脂7g 溶解 灭菌 做斜面 接种

培养基:1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂,或牛肉膏蛋白胨配方(1000ml)加10g的葡萄糖。
ph为7即可,温度30度到37度皆可——条件不是很苛刻,比较容易培养。
我个人觉得培养基的成分有所改变不会影响其性状,毕竟是广泛分布于自然界的菌种嘛。要想大量培养,如果从经济方面考虑还可以用些便宜点的原料。

枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备具体的操作步骤,哪位高手不吝赐教,谢谢...
答:1.种培养。3ml 电转LB培养基,接种,过夜培养 2.主培养。1%接种 3培养至OD 0.5-0.7时集菌,弃上清后,50%甘油重悬菌饼,冰上放置30分钟 4。低温离心10min 弃上清,50%甘油重悬,冰上放30min 5. 低温离心10min 加入200ul 50%甘油重悬,55ul/tube 分装 这是制作电转感受态的方法 ,热转的...

无菌检查法的真菌琼脂培养基
答:上述培养基分别按15ml与40ml或需要量分装于试管功其他容器中,装量约为试管或容器高度的2/5,按规定的温度和时间灭菌。细菌培养基经30~35℃培养48小时,真菌培养基经20~25℃培养72小时后,应无菌生长。 【附注】 肉浸液制备法 取新鲜牛肉,除去肌腱及脂肪,切细,绞碎后,每1000g加水3000ml,充分...

培养基配制
答:为了使食用菌能正常生长发育,培养基除了必须有足够的碳、氮营养外,还应注意碳与氮的比例(碳氮比,C/N)。这样既能保证营养生长阶段对营养的需要,也能保证生殖生长的顺利进行。例如,巴西蘑菇培养料适宜的碳氮比(C/N)为28~30∶1,含氮量1.4%~1.6%,投料量30~35千克/米2。我们可以按照...

实验室36种微生物培养基配制方法
答:在实验室的微生物研究中,配制适宜的培养基是至关重要的。以下是一系列精心设计的培养基配方,为不同类型的微生物提供最优化的生长环境。每一种培养基都针对特定的微生物群体,确保了实验的精确性和可靠性。让我们一起探索这些独特而实用的配方:1. 牛肉膏蛋白胨培养基 (细菌专用): 3g牛肉膏与10g蛋白...

蘑菇怎么养殖方法 蘑菇培养基料如何配制
答:(2)蘑菇床规格为宽1.2m,床底距离地面0.3m,床与床之间距离0.4-0.6m,层与层之间距离0.6m左右,四周留出走道。2、培养料。(1)原料:禽畜粪便、麦草、稻草、石膏粉、过磷酸钙。其中粪便和草的比例为7:3或者是6:4。(2)方法:将稻草晒干切断,粪便晒干后粉碎,用清水浸湿,按照一层草一...

简述配制培养基应遵循的几个原则?
答:1.目的明确 培养不同的微生物必须采用不同的培养条件;培养目的不同,原料的选择和配比不同;例如枯草芽孢杆菌:一般培养:肉汤培养基或LB培养基;自然转化:基础培养基;观察芽孢:生孢子培养基;产蛋白酶:以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基;根据不同的工作目的,微生物不同的营养需要,运用自己...

怎么样配置培养基
答:注:(一)培养基的配制 培养基按组成成分及对这些成分了解的程度分为天然培养基、半组合培养基和组合培养基三类,从物理性质上又分为液体培养基和固体培养基两类,培养基的种类不同,配制方法也有差异,限于时间,本次实验仅配制马铃薯琼脂培养基和牛肉膏蛋白胨培养基。 1�马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA) 这是植病实验室...

求助枯草芽孢杆菌感受态制备方法
答:230 r/min振荡培养3.5h。3. 再将培养物进行第二次传代, 接种于5 mL GMII培养基中,野生型菌株BS501a按5% 接种量进行第二次传代,37℃,200-230 r/min振荡培养90 min。4. 取1mL培养物,5 000 r/min室温离心5 min,用1 /10体积上清液重新悬浮细菌沉淀,即为枯草芽孢杆菌感受态细胞。

如何培养微生物?
答:实验六 革兰氏染色及芽孢染色实验七 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定实验八 微生物直接计数法及测微技术实验九 大肠杆菌生长曲线的测定实验十 水中细菌总数的测定实验十一细菌细胞的生化反应实验实验十二噬菌体的分离、纯化及效价测定实验一 常用培养基的制备、灭菌与消毒一、实验目的了解培养基的配制原理;掌握配制培养...

配制母种培养基有哪几个步骤
答:食用菌母种培养基的配制步骤:1.煮成溶液-马铃薯去皮切成小块,加水煮沸15-20分钟,过滤取其滤液,加入琼酯文火加热使其溶化,再加入葡萄糖或蔗糖等,最后补充水量至1000毫升。玉米粉的配方要先将玉米粉用70摄氏度温水浸泡1小时,再用纱布夹脱脂棉过滤取汁,加入琼酯煮溶,拌入蔗糖,最后加水定容至1000...