DNA重组的流程 基因重组的步骤
1 目的基因的获得
方法有：基因文库（cDNA文库、基因组文库）、PCR（放达效应）、人工合成
2 目的基因与载体连接
方法有：
——粘性末端——全同源性、定向克隆（两种酶切）
定向克隆可防止高背景的产生，因为全同源性会造成载体自连、重组子、目的基因自连三种可能，重组子可能还会出现正反插入的情况，使筛选过程复杂。
——平末端
酶切后也有可能产生平末端，也会出现高背景。
——人工接头——连接子（连入带粘性酶切位点的片断，再酶切）、普适子（一条链连上片断，成为粘性末端）、T-A克隆（PCR中使用的Taq聚合酶会根据模板延伸至后在链末尾加上一个A，可在克隆载体上加上T，使之连接）、同聚物加尾（末端转移酶加尾）
由于平末端连接效率比较低，可在其两端人工修饰
反应体系：目的基因、载体、T4连接酶、缓冲液
3 重组DNA导入受体（宿主）细胞——转化、转染、转导、感染
主要运用的是原核转化（导入感受态细菌，感受态：处于易于吸收外缘DNA的状态，方法：氯化钙法：DNA与其形成羟基-磷酸钙复合物，抗DNase水解）、真核转染。
4 筛选与鉴定
方法：
——遗传学（表形）——插入失活、蓝-白筛选、抗性基因（四环素Tet、氨苄青霉素Amp）
——酶切，在电泳（分子量、构想）
——PCR（特异性引物）
——核酸杂交（southern blot）
——免疫学方法（western blot）
——DNA测序（sanger、焦磷酸测序）
重组dna技术包括哪些主要步骤~
重组DNA技术主要包括四个步骤：提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。
1、提取目的基因
获取目的基因主要有两条途径：一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因；另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。
2、目的基因与运载体结合
目的基因与运载体结合的过程实际上是不同来源的DNA重新组合的过程，是基因工程的核心。
3、将目的基因导入受体细胞
用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。目的基因导入受体细胞后，就可以随着受体细胞的繁殖而复制，由于细菌的繁殖速度非常快，在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。
4、目的基因的检测和表达
目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程。
扩展资料
重组DNA技术是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。因此，供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。
重组DNA技术使用的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶。常用的载体有质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体。
参考资料来源：百度百科-重组DNA技术
基因重组的过程是什么
重组字母turena变成一个单词
答：重组后就是nature，自然
甲病(CF/cf)是某地区人群中常见的遗传病,患者体内外分泌细胞分泌的黏液...
答：所以子女中出现患病男孩的概率是2/3×2/3×1/2=1/18．（3）由于某对夫妇的基因型与图中Ⅱ-3和Ⅱ-4相同，都为CFcf，他们的3个孩子中有1个患甲病的概率是1/4×3/4×3/4×3=27/64．（4）Na+和Cl-进出细胞的方式是主动运输，需要载体和能量．因此，Na+进入导管内，而Cl-没有进入的原因...
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答：（1）水稻根尖成熟区细胞已高度分化，不能再进行细胞分裂，所以不会发生①核DNA→核DNA、③RNA→DNA、⑤染色质→染色体和⑧基因重组等生理过程；（一）根尖成熟区细胞不含时绿体，不能进行光合作用，即不会发生⑦H一O→[H]+O一生理过程．（3）根尖成熟区细胞能进行新陈代谢，所以有蛋白质合成，因...
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答：3.钠(Na)4.镁(Mg)5.铝(Al)6.锌(Zn)7.铁(Fe)8.锡(Sn)9.铅(Pb)10.氢(H)11.铜(Cu)12.汞(Hg)13.银(Ag)14.铂(Pt)15.金(Au)K(钾) Ca(钙) Na(钠) Mg(镁) Al(铝) Zn(锌) Fe(铁) Sn(锡) Pb(铅) (H)(氢) Cu(铜) Hg(汞) Ag(银) Pt(铂) Au(金)这是由活泼...
