低温酶是什么东西？ 为什么低温适合酶的保存，是酶活性低时适合保存吗？
分泌产生的。这些微生物主要分布于南、北极以及
大洋底部等温度较低的区域。(BC<D> 根据生长温度
的上限不同，将低温微生物分为适冷菌（ !"#$%&’(&’)
!%）和嗜冷菌（ !"#$%&’!%*+,）。适冷菌是指在#E 能
够生长，但最适生长温度在"#E F $#E之间，极限
生长温度在4#E的一类微生物；嗜冷菌是指温度低
于#E时能缓慢生长，最适生长温度低于19E，而高
于"#E不能生长的一类微生物。低温微生物代表
着已开始探索，但尚未完全认识的一个新的微生物
领域。
低温微生物在长期的环境适应过程中，产生了
独特的细胞学特征和生理生化特性。这些特征主要
包括以下方面。（1）低温微生物在更大程度上合成
了含有更多不饱和脂肪酸或短链脂肪酸的中性脂质
及磷脂，细胞膜的流动性增强，从而有利于细胞内外
的物质交换〔1〕。（"）细胞质低温防护剂如多元醇
和海藻糖等浓度的改变以及冷激蛋白和冷适应蛋白（GB;H2>GG;<I>D<J>D<BK =CBD@<K）的表达。冷激蛋白和
冷适应蛋白是指微生物在受寒冷刺激后过表达的一
类蛋白质，对低温条件下蛋白质合成的调节以及
I,LM 的折叠起重要作用。（$）产生低温酶。具有
低温条件下催化能力的酶是极地微生物适应低温环
境的一个极为重要的特点，这些酶在低温时有着比
中温酶更高的催化效率，保证了生命活动在低温下
能够正常进行。
#" 低温脂肪酶的酶学特征和结构特征
低温脂肪酶具有下列4 个特征。（1）在较低的
温度下可以得到较多的酶。研究发现，低温菌酶的
产量常常在低于该菌最适生长温度时最高。/@;;@C
等〔"〕从南极海水中分离到4 株产脂肪酶的适冷莫拉
氏菌（-’&./,++. "!0 ），该菌最适生长温度为"9E，
但其脂肪酶的最适分泌量需在更低温度（$E）。分
别在$E、16E和"9E对-’&./,++. +M144 进行培养
和测定脂肪酶活力，发现其代时（N@K@C>D<BK D<I@）和
上清液酶活分别为4A 9、"A #、1A 6（O）和1 19#、$7#、
79（PQ I0）〔$〕。结果表明，在低温条件下得到的酶
量较高，酶的活力也较高，从而保证低温环境中对底
物的高效利用。（"）低温脂肪酶的最适作用温度较
低。MC=<NKR 等〔4〕对静止嗜冷杆菌（1"#$%&’2.$(,& *3)
3’2*+*"）S1# 所产生的脂肪酶与中温的铜绿假单胞
菌（1",45’3’6." .,&47*6’".）49，$66 进行比较研究
时发现，低温脂肪酶的最适作用温度在$9E左右，
#E时仍保留酶活的"#T 左右。而中温酶在高于
3#E时，酶活力仍不断增强，但在"#E以下，酶活几
乎为#。（$）低温脂肪酶的比活力高，热稳定性差。
一般说来，酶的比活力是和热稳定性呈负相关。酶
分子的热稳定性主要来源于分子的刚性，刚性的增
强使得酶与底物的相互作用受到影响，从而导致酶
活性的下降，相反，柔性的增加使得酶促反应的活化能减少，热稳定性降低，但酶的活力提高。与中温酶
相比，低温酶的共同特征是：（1）与蛋白质折叠和稳
定性相关的弱作用（如氢键和盐键）的减少；（2）以
一个低疏水性的疏水区域形成蛋白质的核心；（ 3）
剔除和替换蛋白质二级结构的环和转角处的脯氨
酸；（4）通过增加带电荷的侧链以增加溶剂和亲水
表面的作用；（ 5）在结构功能域附近出现甘氨酸
簇；（6）更广范围内的钙离子配位作用。这些结构
的改变都有利于酶分子柔性的增加〔7〕。（8）低温脂
肪酶的活化能低。酶在低温下具有很高的催化效率
与其具有更松散和更具柔性的蛋白质结构相关联。
这种蛋白质结构允许利用少的能量投入就产生具有
催化效能的构象变化，因此它们与底物结合的活化
能低，特别是在低温和常温与大分子底物结合的活
化能更低〔9〕。如:;<=>?@ 等〔A〕对南极耐冷菌静止嗜
冷杆菌的脂肪酶序列的分析表明，该酶中碱性氨基
酸的摩尔比例（:;> B :;> C /@D）（ 接近于"E !F）较中
温菌（"E 8）和嗜热菌（"E 8F）中的比值低得多；:;> 残
基的存在可使酶分子更加稳固，而在低温脂肪酶中，
:;> 等稳定结构的氨基酸残基数量的减少，有助于
形成一更具柔性的三级结构。另外，GH@ 的增加可
促进蛋白质结构的柔性，从而有助于酶在低温环境
中催化作用时的构象改变。
通过对几种低温脂肪酶氨基酸序列〔A I JJ〕的比
较发现，尽管这些酶的氨基酸序列差异较大，但它们
在脂肪酶活性部位的结构中都包含两个保守序列，
即含有活性)5; 中心的GH@KLJ K)5;KL! KGH@ 和位于脂
肪酶MK末端的%=DKGH@ 肽段。如果以:H1 和GH? 分
别取代保守的)5; 和%=D，脂肪酶的活性会丧失。通
过L 射线衍射技术发现活性部位被包埋在由一个
或两个!K螺旋构成的“ 盖子”结构之下。脂肪酶必
先经过一个构象变化，将盖子移开，暴露活性中心，
才能发挥催化作用。
!" 低温脂肪酶基因的异源表达
低温脂肪酶是一种胞外酶，酶的产生要经过异
源表达，修饰折叠，最终分泌至细胞外。决定脂肪酶
表达的因素是多方面的，如宿主、外源基因、外界环
境以及它们之间的相互作用等。低温脂肪酶的异源
表达大多选择大肠杆菌做为宿主。
现已发现分子伴侣能识别并调节细胞内多肽的
折叠。如果宿主体细胞分子伴侣与外源基因表达所
需要的分子伴侣不匹配，外源基因便不能正确表达。
革兰氏阳性菌所产脂肪酶首先以“ 前酶原”的
形式表达，酶的前体区域（<;5K;5>=N?）为信号肽，运
输酶原至细胞外，酶原在胞外经蛋白酶水解后断裂
产生成熟酶〔J!〕。
+ND5?1O〔J#〕将革兰氏阴性菌脂肪酶的分泌机制
概括为三种类型。（J）含有:*P 结合盒（:Q$）的输
出体（:*PK2=?4=?> 31DD5RR5 5S<N;R5;）。这种类型适
用于M 端缺少代表性的信号序列，但$ 端包含靶信
号序列的脂肪酶的分泌。:Q$ 输出体包括三种蛋
白质，由内而外依次是:*P 酶，弓型的细胞膜融合
蛋白（’.P）和外膜蛋白（-’P）。三种蛋白质组合
体横跨内外细胞膜，从而在周质中形成通道直接将
酶分泌到胞外。（!）分泌子（ D53;5RN?）介导的分泌。
这种类型主要由!"# 基因编码的蛋白质组成，其分
布于细胞内外膜，并在外膜形成孔状通道。（#）自
输送体（1ORNR;1?D<N;R5;）介导的分泌。通过该途径分
泌的脂肪酶尽管分泌到胞外，但仍然与细胞表面密
切相连或紧紧固着在细胞表面。脂肪酶包含两个独
特的结构域，M 端具有催化活性并且暴露在细胞外，
$ 端结构与所谓的自动输送蛋白（ 1ORNR;1?D<N;R5;
<;NR5=?）类似，通过形成"K折叠结构的分泌通道协助
将脂肪酶M 端转运出外膜。
TO@5?〔J8〕在对脂肪酶异源表达的研究时发现，
在分子伴侣的作用下，大肠杆菌中表达的$% "&#’"(’
的脂肪酶可以分泌。但也有学者研究发现，能表达
脂肪酶并不意味着能完全分泌至胞外。有一部分菌
表达的重组蛋白存在于周质中，只有少部分分泌至
胞外。.5HH5; 研究发现，莫拉氏菌*:J88 的脂肪酶
在大肠杆菌中表达后，培养物的上清液几乎没有酶
活性，而菌悬液有一定的酶活力，说明脂肪酶没有分
泌到胞外，而是存在与外周质空间或镶嵌于细胞膜
上。迄今为止，已经有多例低温脂肪酶能用基因工
程技术成功表达的报告。$UNN 等〔F〕将分离自阿拉
斯加土壤的适冷的假单胞杆菌的低温脂肪酶基因在
大肠杆菌中表达。其最适<% 为FE " 左右，在87V
时酶活力最高。以对硝基苯月桂酸酯为底物计算酶
的活化能为AE AW31H B XNH，低于其它南极适冷菌的J!
I JA W31H B XNH，和中温铜绿假单胞菌的!7 W31H B
XNH。.5HH5;〔Y〕报道了一株南极适冷型莫拉氏菌的脂
肪酶基因在中温型大肠杆菌中的克隆与表达。结果
发现，包含有耐冷型脂肪酶编码基因的克隆只有在
生长温度从对应嗜温菌的最适生长温度#AV降至
!7V或JAV以后，才表达有酯解活力脂肪酶，从而
防止基因产物的热变性，重组酶的最适温度比野生
型低了J"V，而且异源表达的脂肪酶比野生型具更
明显的热不稳定性。+1DU=4〔J7〕将深海分离出的假
请问低温降低酶活性的原因是什么~
在一定温度范围内，酶活性随温度升高而升高的原因：
只要升高温度，反应物分子获得能量，使一部分原来能量较低分子变成活化分子，增加了活化分子的百分数，使得有效碰撞次数增多，故反应速率加大（主要原因）。当然，由于温度升高，使分子运动速率加快，单位时间内反应物分子碰撞次数增多反应也会相应加快（次要原因）。
超过最适温度，酶活性随温度升高而降低的原因：
化学本质为蛋白质的酶和核酶，遇热易变性失去活性。超过最适温度后，随温度的升高，一方面使酶促反应速度加快，但更主要的是它又使活性酶的浓度大为降低，因而总的结果是随着温度的升高而反应速度下降。
不是酶的活性低温会保持它的活性，因为高温酶会失活，要达到一定的温度才失活，所以为了防止意外，就用低温保存，因为低温保存时，酶的活性不会失去，只是被抑制而已，当温度恢复时，活性自然就恢复了。
高温,低温使酶活性降低的实质分别是什么
答：高温低温使酶的三级结构破坏。
变温动物体内酶是否受温度影响
答：无论是恒温动物还是冷血动物，只要是酶，其本质绝大多数是蛋白质，都会受到温度的影响。变温动物进入冬眠或夏眠，其生命活动有关的酶类的活性一般就会下降。而恒温动物可以控制自身的温度在一定的范围内，受到外界的影响不大。
中温淀粉酶|中温淀粉酶哪个公司的好?
答：中温淀粉酶是中温α-淀粉酶的简称，中温淀粉酶是采用解淀粉芽孢杆菌 ( Bacillus myloliquefaciens ) 经液体深层发酵、超滤等工序精制而成，具有高效、耐热的优良性能，广泛应用于酒精、啤酒、味精、淀粉糖、发酵工业等淀粉质原料的液化以及纺织、印染行业退浆等。中温淀粉酶，最适作用pH6.0-6.5 ，pH...
凝血酶的最适温度为什么是体温?为什么体内的血液不会被凝血酶凝固?
答：因为凝血酶在血液中是以没有活性的凝血酶元形式存在的，一般情况下只有在形成伤口后，组织中和血小板中释放的凝血致活酶作用于凝血酶元，使其成为有活性的凝血酶，才能对凝血起作用。
为什么低温适合酶的保存,是酶活性低时适合保存吗?
答：不是酶的活性低温会保持它的活性，因为高温酶会失活，要达到一定的温度才失活，所以为了防止意外，就用低温保存，因为低温保存时，酶的活性不会失去，只是被抑制而已，当温度恢复时，活性自然就恢复了。
什么是限速酶有何特点 限速酶的定义以及特点
答：1、限速酶：是指整条代谢通路中催化反应速度最慢的酶，它不但可以影响整条代谢途径的总速度，还可以改变代谢方向。2、特点：高效性；高度专一性；反应条件温和；可调控其活性；其活性与辅酶、辅基和金属离子有关。
...出有活力的原生质体,目前比步骤最常用的是酶解法,也就是在温...
答：细胞壁的主要成分是果胶和纤维素 所以用果胶酶和纤维素酶
家里宠物用的碗有口水味又不敢用洗洁精,有什么安全又平价的宠物清洁品...
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好用的沐浴露
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洗衣机活性酶是什么功能
答：洗衣机活性酶能有效去除污渍。洗衣机活性酶是一种添加在洗衣机洗涤剂里面的生物酶，主要作用是分解、降解并去除衣服表面、细缝和织物内部的污渍。活性酶分为多种类型，每种类型针对不同种类的污渍都有独特的效果，如蛋白酶可去除饭菜渍、血渍和汗渍，淀粉酶可去除油腻和果汁渍，纤维素酶可去除油渍和汗渍...
