测量蛋白质总量的方法有哪些 测定蛋白质的定量的方法有哪些及其原理各是什么
测定蛋白质总量的常用方法有:凯氏定氮法、双缩脲法、 Folinー酚试剂法( Lowry法)、紫外吸收法、染结合法( Bradford法)和胶体金测定法等。这些方法在普通的实验手册中都有详细的叙述。氏定氢法是经典的标准方法，但现已不多用。双缩限法常用于需要快速但并不需要十分精确的测用于白质纯化的头几个步骤的测定。 Lowry法多年来被选为蛋白质标准测定方法，此法基于ia-图试剂能定量地与Cu反应，C是由蛋白质的易氧化成分(如琉基、酚基)还原C而产生的。近开发的一个测定蛋白质的试剂，4，4-二羧-2，2＇-二喹啉( bicinchoninic acid，BCA)，在性溶液中与Cu反应形成色复合体，BCA与Cu反应比 Folin-酚试剂与Cu＇反应更强，其反应式如下:
1.凝胶过滤法 凝胶过滤法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子量的大小。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围，在此范围内，分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。因此，用几种已知分子量的蛋白质为标准，进行凝胶层析，以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数作图，绘制出标准洗脱曲线。未知蛋白质在同样的条件下进行凝胶层析，根据其所用的洗脱体积，从标准洗脱曲线上可求出此未知蛋白质对应的分子量。
2.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 蛋白质在普通聚丙烯酰胺凝胶中的电泳速度取决于蛋白质分子的大小、分子形状和所带电荷的多少。SDS（十二烷基磺酸钠）是一种去污剂，可使蛋白质变性并解离成亚基。当蛋白质样品中加入SDS后，SDS与蛋白质分子结合，使蛋白质分子带上大量的强负电荷，并且使蛋白质分子的形状都变成短棒状，从而消除了蛋白质分子之间原有的带电荷量和分子形状的差异。这样电泳的速度只取决于蛋白质分子量的大小，蛋白质分子在电泳中的相对迁移率和分子质量的对数成直线关系。以标准蛋白质分子质量的对数和其相对迁移率作图，得到标准曲线，根据所测样品的相对迁移率，从标准曲线上便可查出其分子质量。
3.沉降法（超速离心法） 沉降系数（S）是指单位离心场强度溶质的沉降速度。S也常用于近似地描述生物大分子的大小。蛋白质溶液经高速离心分离时，由于比重关系，蛋白质分子趋于下沉，沉降速度与蛋白质颗粒大小成正比，应用光学方法观察离心过程中蛋白质颗粒的沉降行为，可判断出蛋白质的沉降速度。根据沉降速度可求出沉降系数，将S带入公式，即可计算出蛋白质的分子质量。质的沉降速度。S也常用于近似地描述生物大分子的大小。蛋白质溶液经高速离心分离时，由于比重关系，蛋白质分子趋于下沉，沉降速度与蛋白质颗粒大小成正比，应用光学方法观察离心过程中蛋白质颗粒的沉降行为，可判断出蛋白质的沉降速度。根据沉降速度可求出沉降系数，将S带入公式，即可计算出蛋白质的分子质量。
测定蛋白质含量的方法有哪些，其原理各是什么~
Bradford法测定bai蛋白质浓度：实验原理。
双缩脲法（duBiuret法）和zhiFolin—酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制dao,促使科学家们去寻找更好的蛋。
取6支试管分别标号，前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，不加标准蛋白溶液，每支试管液体总量通过加入蒸馏水补足而保持一致。
将液体混合均匀，在室温下放置30分钟，以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。
扩展资料：
紫外吸收法：
大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收，这是由于蛋白质中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在，可用于测定0.1～0.5mg/mL含量的蛋白质溶液。
取9支试管分别标号，前8支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，1号试管不加标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，而不加标准蛋白溶液，每支试管液体总量通过加入蒸馏水补足而保持一致，将液体混合均匀，在280nm波长处进行比色，记录吸光度值。
参考资料来源：百度百科-蛋白质测定
常用的蛋白质纯化方法有离子交换色谱、亲和色谱、电泳、疏水色谱等等
离子交换色谱：蛋白质和氨基酸一样会两性解离，所带电荷决定于溶液ph。ph小于pi时蛋白质带正电，ph大于pi时蛋白质带负电。不同蛋白质等电点的蛋白质在同一个溶液中，表面电荷情况不同。离子交换就是利用不同蛋白质在同一溶液中表面电荷的差异来实现分离的。
亲和色谱：生物大分子有一个特性，某些分子或基因对它们有特异性很强的吸附作用。如镍柱中ni可以与his标签的蛋白结合，这种只针对一种或一类物质的吸附就是亲和色谱的原理。
电泳：sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳，sds能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构，强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的sds溶液中，
与sds分子按比例结合，形成带负电荷的sds-蛋白质复合物，这种复合物由于结合大量的sds，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异，由于sds与蛋白质的结合是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。
疏水色谱：疏水色谱基于蛋白质表面的疏水区与介质疏水配体间的相互作用，在高浓度盐作用下，蛋白质的疏水区表面上有序排列的水分子通过盐离子的破坏被释放，裸露的疏水区与疏水配体相互作用而被吸附。疏水色谱就是利用样品中各组分在色谱填料上配基相互作用的差异，在洗脱时各组分移动速度不同而达到分离的目的。随着盐离子浓度的降低，疏水作用降低，蛋白质的水化层又形成，蛋白质被解吸附。
测定蛋白质的定量的方法有哪些及其原理各是什么
答：（一）实验原理 双缩脲法（Biuret法）和Folin—酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋 白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法（Bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白 质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到...
叙述生物样品中蛋白质含量测定方法有哪些
答：蛋白质含量测定方法有：凯氏定氮法，双缩脲(Biuret)法，酚试剂法(Lowry)法，考马斯亮蓝（Bradford）法，紫外吸收法，BCA法及杜马斯燃烧法。 其中BCA法与Bradford法成为当今实验室最为常用的两种蛋白浓度定量检测方法。BCA法常用现成的试剂盒来做，操作简单又稳定。以下是厚百上BCA蛋白定量试剂盒：厚百...
说明常用蛋白质测定方法的原理,并对各种方法加以比较
答：消化完毕后进行蒸馏，全部蒸馏完毕后用标准盐酸滴定各烧瓶中收集的氨量，直至指示剂混合液由绿色变回淡紫红色，即为滴定终点，结算出蛋白质含量。2、双缩脲法 双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法，硫铵不干扰显色，Cu2+与蛋白质的肽键，以及酪氨酸残基络合，形成紫蓝色络合物，此物在540nm...
蛋白质含量测定方法有哪些
答：蛋白质含量测定方法有多种。一、凯氏定氮法 凯氏定氮法是一种经典的蛋白质含量测定方法。它基于氮含量与蛋白质含量的关系来推算。具体操作流程包括样品消化、蒸馏、氮的吸收以及滴定等步骤，最终通过计算得到蛋白质含量。这种方法适用于各种食品、生物制品等蛋白质含量的测定。二、双缩脲法 双缩脲法是...
蛋白质定量的方法有哪些
答：蛋白质定量的方法主要包括以下几种：1. 凯氏定氮法。这是最经典的蛋白质定量方法，原理是蛋白质中的氮含量相对稳定，通过测定样品中的氮含量来推算蛋白质的含量。这种方法具有操作简单、适用广泛的特点，但误差较大。2. 紫外分光光度法。此方法主要利用蛋白质在特定波长下吸收紫外线的性质进行定量。通过...
蛋白质定量方法有哪些
答：电导法是一种新型的蛋白质检测方法，其原理是蛋白质溶液的电导率与蛋白质浓度成正比。该方法具有操作简便、灵敏度高的特点，但实际应用中可能受到其他电导性物质的干扰。三、总结 以上方法各具特点，应根据样品的特性和实验需求选择合适的方法进行蛋白质定量测定。随着技术的发展，还会有更多的新型蛋白质定量...
常用的血清蛋白质含量测定方法有哪些
答：有利于检测较微量的蛋白质。但试剂反应仍易受多种化合物的干扰。2.紫外测定法 采用280nm和215/225紫外吸收值，计算蛋白质含量280nm 是由于蛋白质分子中存在芳香族氨基酸所致。方法的特异性和准确性受蛋白分子中该种氨基酸的含量比例影响甚大。尿酸和肝红素在280nm附近有干扰。紫外区200-225nm是肽健的...
测定蛋白质含量的方法有哪些,其原理各是什么。
答：Bradford法的突出优点是：（1）灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1g。这是因为蛋白质与染料结合后产生 的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的 多。（2）测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个...
测定蛋白质相对含量的方法有哪些
答：双缩脲是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及...
检测食品中蛋白质含量的原理和方法是什么?
答：二、蛋白质的检测方法：1、凯氏定氮法：样品在高温浓硫酸的消化作用下，将样品中的有机氮转化为无机铵，待消化液冷却后，加入过量的碱，使无机铵转化为挥发性的氨，再将氨蒸出后，利用盐酸标准溶液滴定，最后根据消耗的盐酸标液体积推算样品中的氮含量。2、杜马斯定氮法：样品在高纯氧中充分燃烧的...
