基因工程表达目的蛋白时常用蛋白质变性和复性方法来纯化蛋 白质，为什么 蛋白质变性及复性的常用方法有哪些
（一）生物活性丧失 蛋白质的生物活性是指蛋白质所具有的酶、激素、毒素、抗原与抗体、血红蛋白的载氧能力 等生物学功能。 生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。 有时蛋白质的空间结构只有轻微变 化即可引起生物活性的丧失。
（二）某些理化性质的改变 蛋白质变性后理化性质发生改变， 如溶解度降低而产生沉淀， 因为有些原来在分子内部的疏 水基团由于结构松散而暴露出来,分子的不对称性增加，因此粘度增加，扩散系数降低。
（三）生物化学性质的改变 蛋白质变性后，分子结构松散，不能形成结晶，易被蛋白酶水解。蛋白质的变性作用主要是 由于蛋白质分子内部的结构被破坏。 天然蛋白质的空间结构是通过氢键等次级键维持的， 而 变性后次级键被破坏， 蛋白质分子就从原来有序的卷曲的紧密结构变为无序的松散的伸展状 结构（但一级结构并未改变）。所以，原来处于分子内部的疏水基团大量暴露在分子表面， 而亲水基团在表面的分布则相对减少， 至使蛋白质颗粒不能与水相溶而失去水膜， 很容易引 起分子间相互碰撞而聚集沉淀。
复性：如果变性条件剧烈持久，蛋白质的变性是不可逆的。如果变性条件不剧烈，这种变性 作用是可逆的，说明蛋白质分子内部结构的变化不大。这时，如果除去变性因素，在适当条 件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性，这种现象称为蛋白质的复性
用基因工程方法大量表达内在膜蛋白为什么会存在着很大的困难~
基因工程的方法表达蛋白质，并且要大量表达，那么高活性的表达受体是必须的，而且目的基因的活性和其他方面要求自然也高了。
然后是培养，只有把受体培养好了，才能大量表达你所需要的内在膜蛋白。
接下来是表达。内在膜蛋白是一种蛋白质，蛋白质的合成在核糖体，其后经过内质网，高尔基体各种加工。
最后一步是运输和表达。要准确无误的运输到目的地，再表达。
一步一步不能出错，自然是有难度的。不过现在生物技术发展很快，所有的难题相信都会一步一步攻克的。加油。
引起蛋白质变性的因素很多，物理因素有高温、紫外线、X-射线、超声波、高压、剧烈的搅 拌、震荡等。化学因素有强酸、强碱、尿素、胍盐、去污剂、重金属盐（如 Hg2+、Ag+、Pb2+ 等）三氯乙酸，浓乙醇等。不同蛋白质对各种因素的敏感程度不同。 蛋白质变性后许多性质都发生了改变，主要有以下几个方面：
（一）生物活性丧失 蛋白质的生物活性是指蛋白质所具有的酶、激素、毒素、抗原与抗体、血红蛋白的载氧能力 等生物学功能。 生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。 有时蛋白质的空间结构只有轻微变 化即可引起生物活性的丧失。
（二）某些理化性质的改变 蛋白质变性后理化性质发生改变， 如溶解度降低而产生沉淀， 因为有些原来在分子内部的疏 水基团由于结构松散而暴露出来,分子的不对称性增加，因此粘度增加，扩散系数降低。
（三）生物化学性质的改变 蛋白质变性后，分子结构松散，不能形成结晶，易被蛋白酶水解。蛋白质的变性作用主要是 由于蛋白质分子内部的结构被破坏。 天然蛋白质的空间结构是通过氢键等次级键维持的， 而 变性后次级键被破坏， 蛋白质分子就从原来有序的卷曲的紧密结构变为无序的松散的伸展状 结构（但一级结构并未改变）。所以，原来处于分子内部的疏水基团大量暴露在分子表面， 而亲水基团在表面的分布则相对减少， 至使蛋白质颗粒不能与水相溶而失去水膜， 很容易引 起分子间相互碰撞而聚集沉淀。
复性：如果变性条件剧烈持久，蛋白质的变性是不可逆的。如果变性条件不剧烈，这种变性 作用是可逆的，说明蛋白质分子内部结构的变化不大。这时，如果除去变性因素，在适当条 件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性，这种现象称为蛋白质的复性
生物工程技术包括哪几个方面?
答：3、蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得蛋白质的物理化学和分子特性的信息。在此基础上，有目的地设计和修饰编码蛋白质的基因，并利用基因工程技术获得表达蛋白质的基因。因为生物系统，这个生物系统可以是转基因微生物、转基因植物、转基因动物，甚至是细胞系统。4、...
基因工程目的基因成功表达的标志是什么?
答：目的基因成功表达的标志是在生物体内检测到了该基因对应的蛋白质，表达出了相应的性状。基因工程（英语：genetic engineering，又称为遗传工程、转基因、基因修饰）是一组使用生物技术直接操纵有机体基因组、用于改变细胞的遗传物质的技术。包括了同一物种和跨物种的基因转移以产生改良的或新的生物体。可以通过...
制备基因工程药物时,哪些因素会影响目的蛋白质在发酵液中的表达量
答：制备基因工程药物时，哪些因素会影响目的蛋白质在发酵液中的表达量 （1）①质粒是双链环状DNA分子，基因工程中常用的一种运载体．把图中甲与乙拼接起来需要采用DNA连接酶；a与b互补配对，c与d互补配对，若a段与d段的碱基序列分别是AATTC和CTTAA，根据碱基互补配对的规律，b段与c段的碱基序列分别是TTA...
怎么利用层析法纯化酶如何确定目的蛋白?
答：层析法纯化酶介绍：Protein A，Protein G和Protein L是三种细菌蛋白，因其与抗体的高效结合而被大家所熟知。这些蛋白经过基因工程编辑重组表达，通常用于从各种不同物种中进行关键抗体类型的亲和纯化。动脉硬化症、高血脂及糖尿病等。鉴于α淀粉酶抑制剂的重要生物学功能，许多学者对不同来源的α淀粉酶抑制...
如何用已有的cDNA,做出相应的蛋白质?请写出详细的操作步骤,谢谢_百度...
答：可以利用基因工程技术进行蛋白质表达。一个完整的基因克隆过程可以用分、切、接、转、筛五字概括。分：即分离出感兴趣的外源基因---目的基因，其来源途径有：PCR技术，化学合成法，酶促合成cDNA，制备的基因组DNA。其中最常用的是PCR技术。由于外源DNA片段离开染色体是不能复制的，就需要将外源DNA连到复...
基因工程菌表达产物是不是都是蛋白质
答：遗传背景清楚 ;目标基因表达水平高;表达系统成熟完善;易于培养（培养方法简单、生长快、培养周期短、抗污染能力强）、成本低;被美国FDA批准为安全的基因工程受体生物.缺点：表达产物缺少饭以后的修饰（如糖基化、烷基化、磷酸化、特异性的蛋白水解加工等）；同时高表达时易折叠错误导致表达产物没有活性,...
基因工程和蛋白质工程的比较
答：DNA序列分析技术、寡核苷酸合成技术、基因定点突变技术、聚合酶链反应技术。2、物质运用不同：蛋白质工程可以制造一种新的蛋白质；基因工程只能利用已有的现实中已存在的基因。3、实施对象不同：蛋白质工程是对于蛋白质而言的改造和制造；基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术。
高中生物:基因工程中将目的基因导入大肠杆菌和酵母菌中的目的是什么
答：也就是说，只有目的基因通过传染进了目的菌体，通过寄主的蛋白质表达系统，才能生成目的蛋白，进而表现目的性状，如抗虫。很多抗生素就是这样生产的，通过特定基因的制作、侵染、整合、表达，进而在宏观表现上完成工业化大生产。而病毒做运送载体，是会导致细胞裂解的，但是有过程的。也正是因为会导致受体...
怎样利用基因工程制药?
答：前提:较小的蛋白质或多肽的编码基因,必须知道目的基因的核苷酸排列顺序,或知道目的蛋白质的氨基酸顺序,再按相应的密码子推导出DNA的碱基序列.操作:见书 限制:一,不能合成太长的基因.二,人工合成基因时,遗传密码的简并会为选择密码子带来很大的困难.三,费用高 基因表达 基因表达是指结构基因在生物体中...
基因工程和蛋白质工程有什么区别?
答：2、手段不同 基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。蛋白质工程在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物系统，这个生物系统可以是转基因微生物、转基因植物、转基因动物，甚至可以是细胞系统。3、工作原理不同 基因工程是用...
