气相色谱法的内标法是怎么回事? 气相色谱分析中,内标法的优点是什么,在什么情况下使用内标法进...

作者&投稿:屈秋 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

按下列公式和方法即可求出被测组分在样品中的百分含量:

校正因子(f):

f= (As/ms)/(Ar/mr)

其中As和Ar分别为内标物和对照品的峰面积或峰高,ms和mr分别为加入内标物和对照品的量。

再取各品种项下含有内标物的待测组分溶液进样,记录色谱图,再根据含内标物的待测组分溶液色谱峰响应值,计算含量(mi):

mi=f×Ai/(As/ms)

其中 Ai和As分别为供试品和内标物的峰面积或峰高,ms为加入内标物的量。必要时,再根据稀释倍数、取样量和标示量折算成为标示量的百分含量,或根据稀释倍数和取样量折算成百分含量。

内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。

影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素:

影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。化学方面的因素包括:内标物在样品里混合不好;内标物和样品组分之间发生反应;内标物纯度可变等。

内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,这样它能以、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,建议是被分析物质的一个同系物。

当然,在色谱分析条什下,内标物必须能与样品中各组分充分分离。需要指出的是,在少数情况下,分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率。

此时,他可以使用一种在这种过程中很容易被回收的化台物作内标,来测定感兴趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所说的选择原则。

以上内容参考:百度百科-内标法



一般色谱检测样品使用的有面积归一法,校正面积归一法,内标法,外标法,校正曲线等等,在实际工作中,由于进样量的误差,方法上会造成实际误差,导致结果会出现偏差,为了避免进样量误差产生,产生了内标法的这种方法,简单的说,就是在样品中加入定量的内标物作为参照物,当进样量减少或增大的时候,内标物的含量也同时增大和减少,这样物质组份是参照内标物来计算的时候,进样量的大小就互相抵消了,可以最大限度的减少因进样量的大小产生的误差



楼上正解,建议楼主百度一下,这三个方法网上都介绍的很清楚。

内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积(或峰高)及相对校正因子,按下列公式和方法即可求出被测组分在样品中的百分含量:
校正因子(f):
f= (As/ms)/(Ar/mr)
其中As和Ar分别为内标物和对照品的峰面积或峰高,ms和mr分别为加入内标物和对照品的量。
再取各品种项下含有内标物的待测组分溶液进样,记录色谱图,再根据含内标物的待测组分溶液色谱峰响应值,计算含量(mi):
mi=f×Ai/(As/ms)
其中 Ai和As分别为供试品和内标物的峰面积或峰高,ms为加入内标物的量。必要时,再根据稀释倍数、取样量和标示量折算成为标示量的百分含量,或根据稀释倍数和取样量折算成百分含量。
摘自:百度百科-内标法

气相色谱内标法检测的相关问题~

内标法和外标法本质上是一样的
外标法是根据浓度和响应值的线性关系定量的,未知样品的浓度是通过响应值导入校正方程换算得到的。
内标法是根据浓度比率(标准/内标物)和响应值比率(标准/内标物)的线性关系定量的,未知样品的浓度是通过响应值比率(样品/内标物)导入校正方程换算得到的,其中内标物的浓度是已知的,并且样品与标准溶液的浓度是一致的。
你说的这个相对校正因子应该指的是校正方程的斜率和截距,这个数值是通过标准溶液的浓度比率和响应值比率拟合出来的,并没有什么特别的要求。
内标法的校正曲线可以校正仪器的小幅度的波动,但也不是从来不变的,一般是隔天或走过其他的方法就需要重新校正了。
高浓度的农药标准(100`1000 mg/L)在密封(储液瓶或安瓿瓶)低温避光的条件下可以保存很久,一般是一年,低浓度(<100 mg/L)的一般保存3个月,到期后用新的标液做一下核查,如果目标物绝对响应差别不超过5%,一般认为无显著性差异,可以继续使用,直到偏差超过5%后弃用,这样可以得到储备液的大致有效期。
内标物一般是液体,当然是配制好了以后再加,前处理加内标可以在提取的时候加也可以上机前加,大多数内标是用于校正仪器的偏差,所以上机前把配制好的内标溶液加到样品中去就可以了,只是要确保上机的内标浓度和标准溶液里的内标浓度一致。

内标法与外标法

一、内标法

什么叫内标法?怎样选择内标物?

内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。

内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。当然,在色谱分析条什下,内标物必须能与样品中各组分充分分离。需要指出的是,在少数情况下,分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率,此时,他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标,来测定感兴趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所说的选择原则。

在使用内标法定量时,有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值?

影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。

由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。

化学方面的因素包括:

1、内标物在样品里混合不好;

2、内标物和样品组分之间发生反应,

3、内标物纯度可变等。

对于一个比较成熟的方法来说,色谱方面的问题发生的可能性更大一些,色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大,对面积比的影响则要小一些,但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度,那么一定有某个重要的色谱问题存在,比如进样量改变太大,样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别,检测器非线性等。进样量应足够小并保持不变,这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。如果认为方法比较可靠,而色谱固看来也是正常的话,应着重检查积分装置和设置、斜率和峰宽定位。对积分装置发生怀疑的最有力的证据是:面积比可变,而峰高比保持相对恒定,

在制作内标标准曲线时应注意什么?

在用内标法做色话定量分析时,先配制一定重量比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析,测量峰面积,做重量比和面积比的关系曲线,此曲线即为标准曲线。在实际样品分析时所采用的色谱条件应尽可能与制作标准曲线时所用的条件一致,因此,在制作标准曲线时,不仅要注明色谱条件(如固定相、柱温、载气流速等),还应注明进样体积和内标物浓度。在制作内标标准曲线时,各点并不完全落在直线上,此时应求出面积比和重量比的比值与其平均位的标准偏差,在使用过程中应定期进行单点校正,若所得值与平均值的偏差小于2,曲线仍可使用,若大于2,则应重作曲线,如果曲线在铰短时期内即产生变动,则不宜使用内标法定量。

二、外标法

用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。此法可分为工作曲线法及外标一点法等。工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线,求出斜率、截距。在完全相同的条件下,准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液,根据待测组分的信号,从标准曲线上查出其浓度,或用回归方程计算,工作曲线法也可以用外标二点法代替。通常截距应为零,若不等于零说明存在系统误差。工作曲线的截距为零时,可用外标一点法(直接比较法)定量。

外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i组分的含量。将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样,测得峰面积的平均值,用下式计算样品中i组分的量:

W=A(W)/(A)

式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分的重量及相应的峰面积。(W)及

(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯品i组分的重量及相应峰面积。外标法方法简便,不需用校正因子,不论样品中其他组分是否出峰,均可对待测组分定量。但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。此外,为了降低外标一点法的实验误差,应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。

外标法 external standard method

色谱分析中的一种定量方法,它不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定,把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度,分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近,以利于定量分析的准确性。

三、定量分析中怎样选择内标法或外标法(来源:药物分析网)

选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组分),然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液,进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中,进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。用内标法公式计算即可。

内标法是将一定量的纯物质作内标物,加入到准确称量的试样中,根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比,来计算被测组分的含量。

选择内标物有4个要求:1.内标物应是该试样中不存在的纯物质;2.它必须完全溶于试样中,并与试样中各组分的色谱峰能完全分离;3.加入内标物的量应接近于被测组分;4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近,或在几个被测组分色谱峰中间。

内标法的优点是测定的结果较为准确,由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的,因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。内标法的缺点是操作程序较为麻烦,每次分析时内标物和试样都要准确称量,有时寻找合适的内标物也有困难。

外标法简便,但进样量要求十分准确,要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行,否则造成分析误差,得不到准确的测量结果。

内标与外标都是定量的一种方法而已,至于哪一种方法好与不好不能一概而论,做不同的分析,面对着不同的要求,再加上分析成本分析效率等等问题,我想简单而有效进行定量分析来满足要求才是最重要的。

2、上面已经提到当做方法验证的时候,当同一样品配制6个样品溶液用所选用的外标法进行定量的时候,RSD都满足1.5%的要求时,也分为两种情况,小于1%和大于1%小于1.5%。如果RSD的结果小于1%,那这个方法就没有什么可以怀疑的了;如果RSD的结果大于1%而在1.5%略低一些的范围活动时,这个方法的可行性就将受到质疑,毕竟这是方法验证,你就要考虑上面1所提到的影响因素的影响了,如果排除掉以上的影响因素,RSD还是在1.5%附近,就要尝试内标了,如果内标结果的RSD很好,就证明你的这个方法受实验条件的影响很大,只能用内标了,或者干脆将原方法做大的变动,再尝试用外标法测试。

3、而对于微量分析,比如农药和兽药残留的分析、环境分析等,根据不同的限量标准要求对于精密度的要求也比常量分析的要求要宽松的多,RSD有时可以允许达到10%甚至更高,这时可能外标法有更大的应用空间。

4、单从精密度方面去考虑,排除其它成本和效率的因素,个人认为还是内标优于外标。曾经做过一个中间体二氨基丙醇的常量定量分析,以二乙醇胺为内标,RTX-5

amine(碱改性)

结论:应用外标法能够满足要求,首选还是外标法了,毕竟简单而省事。对于精密度要求比较高、结果准确度会产生重大影响、实验室条件不是很理想的等等条件下,用内标法还是必要的。无论应用那种方法,方法的验证和确认都是很重要的,只要是按照程序经过验证和确认的方法,都有其应用的空间的

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什么是内标法,其计算公式是什么?
答:内标法计算公式为f= (As/ms)/(Ar/mr) ,mi=f×Ai/(As/ms) 。内标法计算按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和内标物,分别配成溶液,精密量取各溶液,配成校正因子测定用的对照溶液。取一定量进样,记录色谱图,用含对照品和内标物的对照溶液所得色谱峰响应值。其中As和Ar分别为...

为什么用气相色谱法测定制剂中乙醇含量用内标法?
答:装配有火焰离子化检测器及Porapak Q柱的气-固色谱技术在药物制备中一直被用来鉴定和检测乙醇、异丙醇以及丙酮。此项技术是用稀释过的样品的水溶液直接进样, 方法简单而直接。样品制备 将两份0.5毫升的异丁醇内标物 (浓度为10mg/ml水,其配制法为:用吸量管吸取12.4ml 异丁醇用水稀释至1L ), 用...

内标法定量的原理,方法及特点
答:2、配制待测物和内标物的混合溶液:将待测物和内标物按照一定的比例混合,配制成混合溶液。3、进行色谱分析:将混合溶液进行色谱分析,记录待测物和内标物的峰面积或峰高。4、计算待测物的浓度或含量:根据待测物和内标物的峰面积或峰高,利用内标法定量公式计算出待测物的浓度或含量。特点:1、...

气相色谱法为什么多用内标法?
答:内标法,不受手动进样的误差影响,结果相对来说要精确些。

内标法的原理是什么?
答:用含对照品和内标物的对照溶液所得色谱峰响应值,计算出校正因子f,再根据此校正因子f和在待测样品中加入的内标物的量,及待测样品各色谱峰响应值,即可计算出待测样品中指定色谱峰对应的物质的量。内标法的优点:对进样量不严格要求,测定的结果也较为准确,由于通过测量内标物及被测组分的峰面积...

色谱分析中,什么情况采取内标法?
答:的波动带来的误差。内标法只要求待测组分出峰或完全分离即可,其余组分则可用快速升高柱温使其流出或用反吹法将其放空,缩短了分析时间。缺点:内标物选择困难。范围:当样品的所有组分不能全部流出色谱柱时,或检测器不能对每个组分都产生信号,或者只需要测定样品中某几个组分含量时,可采用内标法。

定量分析中怎样选择内标法和外标法
答:内标法:内标法是一种间接或相对的校准方法.在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度.使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分...

气相色谱定量分析方法有哪些
答:气相色谱的定量方法主要有:归一化法、外标法、内标法、内标校正曲线、内标对比法和内加法等。1、归一法:优点是简便,定量结果与进样量无关、操作条作变化时对结果影响较小,缺点时必须所有组分在一个分析周期内都能流出色谱柱,而且检测器对它们都产生信号。该法不能用于微量杂质的合量测定。2、外...

如何定量分析气相色谱法?
答:气相色谱的定量方法主要有:归一化法、外标法、内标法、内标校正曲线、内标对比法和内加法等。(1)归一法:优点是简便,定量结果与进样量无关、操作条作变化时对结果影响较小,缺点时必须所有组分在一个分析周期内都能流出色谱柱,而且检测器对它们都产生信号。该法不能用于微量杂质的合量测定。(2...

气相色谱和原子吸收中的内标法和外标法是一样的吗
答:外标法一样,都是制作工作曲线。内标法不一样,气相色谱加入不影响待分析的不同物质,原子吸收加入一定量待分析的物质,也叫标准加入法。